液相色谱三重四级杆串联质谱法检测多农残方法探究
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本试验主要是比较QuEChERS和NY-761改进的2种不同的前处理方法效果，液相色谱质谱法检测多菌灵、吡虫啉、嘧霉胺、涕灭威、克百威等16种农药在花菜基质上的加标回收情况，结果显示，在低（25μg/kg）、中（50μg/kg）、
高（80μg/kg）3种添加浓度水平下，QuEChERS方法平均回收率为51.08%～177.35%，波动较大；NY-761改进前处理法平均回收率为79.25%～106.76%之间，相对稳定。
农药残留；前处理；高效液相色谱-串联质谱法
TS207.53 A 10.11974/nyyjs.20160631004
随着农产品质量安全问题越来越受到人们的重视，农产品检测机构面临大量的检测工作，实现多农残准确定性定量检测是许多农药残留分析检测人员努力的目标。目前，检测农药残留仪器主要是速测仪、液相色谱仪、气相色谱仪以及气相色谱-质谱仪、液相色谱-质谱仪，能够比较准确定性定量检测仪器主要是液相色谱仪、气相色谱仪以及气质和液质联用仪。
笔者采用液质联用仪检测多菌灵、吡虫啉、嘧霉胺、涕灭威、克百威等16种农药在花菜基质上采用2种不同的前处理方法上加标回收，主要是QuEChERS前处理方法和NY-761改进方法结果比较，从而为检测人员提供一些参考。其中QuEChERS改进前处理方法是在QuEChERS前处理方法最后一步净化不过石墨化碳黑；NY-761改进方法主要是把2次水浴温度降到40℃氮吹浓缩，洗脱液二氯甲烷：甲醇的比例从99：1改为95：5。
1 试验部分
1.1 仪器与试剂
Agilent 1290液相色谱仪，Agilent 6460C三重四极杆质谱仪（配电喷雾离子源）；高速分散器（IKA），离心机（赛默飞），旋涡混合器（IKA）；固相萃取装置（天津恒奥，HHE-12B），氮吹仪（北京同泰联，TTL-DCII），天平（艾德姆，HCB602H），瓶口分液器（德国普兰德）。
16种农药为涕灭威、涕灭威亚砜、涕灭威砜、多菌灵、吡虫啉、克百威、3-羟基克百威、啶虫脒、敌敌畏、嘧霉胺、咪鲜胺、烯酰吗啉、辛硫磷、苯醚甲环唑、二甲戊灵、阿维菌素，标准品纯度均不低于99%，均购买于农业部环境质量监督检验测试中心（天津），乙腈、甲醇为色谱纯（天地），甲酸为优级纯，氯化钠为分析纯，无水硫酸镁为分析纯，石墨化碳黑和PSA （Aiglent），NH2柱（Aiglent）。
1.2 试验设计
本试验通过加标回收验证检验检测方法，思路为设3个浓度梯度，从低到高分别为25μg/kg、50μg/kg、80μg/kg，每个浓度设3个平行样，另设空白样品同时比对。标准曲线配制 ：标准曲线浓度5个点分别为6.25μg/kg ，
12.5μg/kg， 25μg/kg， 50μg/kg， 100μg/kg，按16种农药参数配成覆盖2个数量级的混合标样。
1.3 样品前处理过程
方法1（QuEChERS法） 准确称取10.00g（精确到0.01g）均匀试样，加入3～5g无水氯化钠，再加入10.00mL乙腈， 高速分散器12000r/min均质2min，离心机7000r/min离心3min，吸取上清2.00mL过石墨化碳黑、无水硫酸镁和PSA混合物，且过0.22μm有机系滤膜，装样品瓶备用。
方法2（NY-761改进法）准确称取25.00g（精确到0.01g）均匀试样，加入50.00mL的乙腈，以12000r/min均质2min，从上述上清液准确吸取10.00mL，水浴40℃氮吹至近干，用氨基柱净化。净化过程为：用4mL体积比为95：5的二氯甲烷：甲醇溶淋洗液活化氨基柱，再用2mL淋洗液将样品转移到小柱，重复淋洗2次，接收洗脱液，水浴40℃氮吹至近干，用甲醇定容至5.00mL，涡旋溶解，过0.22μm有机系滤膜，装样品瓶备用。
1.4 色谱条件
色谱柱：Agilent C18 柱 （Rapid Resolution HD 2.1 ×10 0mm，1.8-Micron）；流 动 相：A相为0.1% （v/v，下同）甲酸水（含5mM的乙酸铵），B相为0.1% 甲酸甲醇（含5mM的乙酸铵）；梯度洗脱程序：0～0.5min，保持95%A，0.5～3min，从95%A变为60%A，3～17min，从60%A变为0；17～19min保持100%B，19～19.1min，从100%B变为5%；流速：0.4ml/min；进样量：1.5 μL；时间：22min；柱温：30 ℃ 。
1.5 质谱条件
电离模式：电喷雾正离子（ESI+）；毛细管电压：40kV；离子源温度：325℃；干燥气流速：11L/ min，雾化器压力：45psi；采集方式：多反应监测扫描模式（MRM）；增加电压（+）：300V。质谱采集参数见表1以及16种农药标准样品的总离子流色谱图见图1 （其中3-羟基克百威和啶虫脒为重峰；烯酰吗啉为双峰） 。
图1 16种农药的总离子流色谱图
表1 16种农药的保留时间、定量离子对、定性离子对、锥孔电压和碰撞能量
农药名称 保留时间 定性离子 定量离子 碰撞能量 裂解电压
涕灭威亚砜 2.839 207.1，89.1 207.1，131.9 0，8 65
涕灭威砜 3.060 223.1，76 223.1，86.1 0，8 80
多菌灵 3.609 192.1，132.1 192.1，160.1 32，16 105
吡虫啉 4.030 256，175 256，208.9 12，12 80
3-羟基克百威 4.377 238，181 238，163 5，10 80
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