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富硒女贞子对山羊生产性能、血液学和血清生化指标的影响

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  摘要: 为研究富硒女贞子对山羊生产性能、血液学和血清生化指标的影响,选取30只山羊随机均分为5组,其中C组饲喂基础日粮,CLL组基础日粮中添加女贞子30 g/(只・d),LSLL组、MSLL组、HSLL组基础日粮中分别添加富硒女贞子10、30、50 g/(只・d),给药组于试验开始的第5天给药,连续5 d。进行产奶量、血液中WBC、RBC、HGB含量、血清中TP、ALB、ALT、AST、CK、LDH的水平测定。结果显示:富硒女贞子和普通女贞子均能提高山羊的产奶量,在试验1~7 d、22~38 d产奶量增长率由大到小的排序为:LSLL组>MSLL组>HSLL组>CLL组>C组;CLL组能显著提高山羊RBC(P<0.05),MSLL组、CLL组均能显著提高山羊HGB含量(P<0.05);LSLL组、MSLL组、HSLL组和CLL组均能显著提高山羊血清中TP含量(P<0.05),LSLL组、MSLL组和CLL组均能显著提高山羊血清中ALB含量(P<0.05),LSLL组能显著降低血清中AST活性(P<0.05);添加富硒女贞子对山羊WBC含量、ALT、CK、LDH活性均无显著影响(P>0.05)。说明日粮中添加富硒女贞子在提高山羊产奶量的同时,亦提高了血液RBC、HGB和血清TP、ALB的含量,降低了血清AST活性,对山羊WBC、ALT、CK、LDH活性影响不明显。
  关键词: 富硒女贞子;山羊;生产性能;血液学;血清生化
  中图分类号: S853.72 文献标志码: A 文章编号:1002-1302(2016)03-0256-04
  随着规模化、集约化养殖模式的不断发展,使用抗生素类添加剂来提高动物生产水平、降低发病率已成为普遍现象,但长期不加选择地滥用抗生素类饲料添加剂,导致了一系列耐药微生物的出现,给畜禽疾病的防治带来了新的难题,亦给人类健康带来了潜在的威胁。中草药由于含有多糖、生物碱、蛋白质、氨基酸、苷类、矿物质元素和维生素等生物活性物质,使其具有健脾开胃、提高畜禽生长速度、增强动物免疫机能、改善动物产品品质、提高饲料报酬等效果而备受关注[1]。中草药资源丰富,其作用和安全性已被人们所认可,作为动物饲料添加剂是近年来国际动物营养学研究的一大热点。本研究的目的是考察富硒女贞子对山羊的生产性能、血液学和血液生化指标的影响,为新型药源素材研究提供理论依据。
  1 材料与方法
  1.1 材料
  1.1.1 试验山羊 选用30只体质量、胎次、泌乳量相近,分娩日期与体况相近并处于泌乳期的成年健康萨能山羊作为试验对象。试验地点:上海浦东新区杰隆生物制品股份有限公司试验羊场。
  1.1.2 试验药材 富硒女贞子(硒含量1.88 μg/g)、对照药女贞子由笔者所在实验室保存[2],60 ℃烘干粉碎。
  1.1.3 主要仪器 BS-120生化分析仪、BC-2800vet血液细胞分析仪(迈瑞mindray),通用台式冷冻离心机(Eppendorf公司),一次性使用负压采血管(江苏荣业科技有限公司产品),核酸蛋白浓度检测仪(美国伯腾仪器有限公司)。
  1.2 方法
  1.2.1 分组及处理方法 选用30只泌乳期健康萨能山羊,经编号随机均分5组,分别为空白对照组(C组,基础日粮)和4个试验给药组,即普通女贞子组(CLL组,基础日粮+女贞子30 g/(只・d))、富硒女贞子低剂量组[LSLL组,基础日粮+富硒女贞子10 g/(只・d)]、富硒女贞子中剂量组[MSLL组,基础日粮+富硒女贞子30 g/(只・d)]、富硒女贞子高剂量组[HSLL组,基础日粮+富硒女贞子50 g/(只・d)],饲养于同一羊舍,采用舍饲圈养方式饲养,自由饮水。试验期从2014年5月5日至6月12日(共38 d),给药组于试验开始的第5天给药,连续5 d。
  1.2.2 测定指标
  1.2.2.1 产奶量的采集与分析 试验期间每天记录羊的产奶量,试验结束后统计分析每组产奶量的变化规律。
  1.2.2.2 血液样品的采集保存与分析 在试验1、7、14、21、38 d的06:30,试验羊空腹状态下颈静脉无菌采血7 mL,分成2份,分别为:2 mL置于含EDTA-K2抗凝剂的负压采血管进行血液学指标的测定;5 mL置于负压采血管常温保存,待血清析出后离心(3 000 r/min,4 ℃,10 min),血清分装于EP管中,-20 ℃保存,用于检测血清生化指标含量。血液学指标:主要检测白细胞数(WBC)、红细胞数(RBC)和血红蛋白(HGB),均采用BC-2800vet血液细胞分析仪测定。血清生化指标:采用BS-120生化分析仪测定血清中总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肌酸磷酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)的含量。样品测定所用试剂盒均购自深圳迈瑞公司。
  1.3 数据分析
  试验数据采用SPSS 17.0统计软件处理,运用方差分析进行分析,统计结果以x±s表示,P<0.05为差异显著。
  2 结果
  2.1 富硒女贞子对山羊产奶量的影响
  由表1可知,随着时间的延长,C组的产奶量呈先上升后下降的趋势,富硒女贞子各剂量组的产奶量均呈先上升再下降最后上升的趋势,CLL组的产奶量一直呈上升趋势。试验1~7 d各组的产奶量均增加,且各给药组的增长率较C组大(增长率是指该组某时间段的产奶量与同组试验前5 d的平均产奶量相比);8~14 d、15~21 d各组的产奶量上升率较1~7 d小甚至下降;22~38 d时,各给药组的产奶量均增加,C组则下降。在试验1~7 d、22~38 d产奶量增长率由大到小的排序为:LSLL组>MSLL组>HSLL组>CLL组>C组。
  2.2 富硒女贞子对山羊血液学指标的影响   由表2可知,给药后各组WBC都有所提高,但差异不显著(P>0.05),C组WBC在各时间点变化不大。各给药组的RBC随着试验时间的延长变化不大,在试验7、14、21 d时,CLL组的RBC显著高于C组(P<0.05),其余时间点各组间RBC差异不显著(P>0.05)。各组的HGB含量随着试验时间的延长呈先下降后上升的趋势。在试验1、7、21、38 d时MSLL组的HGB含量均显著高于C组(P<0.05),在试验14、21、38 d时CLL组的HGB含量均显著高于C组(P<005),其余时间点各组间RBC差异不显著(P>0.05)。
  2.3 富硒女贞子对山羊血清生化指标的影响
  由表3可知,各给药组的TP与ALB含量随着时间的延长均有所提高,C组则有所下降,但差异均不显著(P>0.05)。其中14 d时各剂量富硒女贞子组的TP含量极显著高于C组(P<0.01),21、38 d时LSLL组的TP含量显著高于C组(P<0.05);7 d时LSLL组、CLL组的ALB含量显著高于C组(P<0.05),38 d时LSLL组、MSLL组、CLL组的ALB含量显著高于C组(P<0.05)。各组ALT、AST的活性随着试验时间的延长均呈下降趋势。38 d时LSLL组、CLL组、C组的ALT活性显著低于7、14 d的活性(P<0.05),MSLL组、HSLL组的ALT活性随着时间的延长差异不显著(P>0.05);38 d时MSLL组的AST活性显著低于7 d的活性(P<0.05),38 d时C组的AST活性显著低于14 d的活性(P<0.05),14 d 时LSLL组的AST活性显著低于C组(P<0.05),38 d时CLL组显著高于C组(P<0.05)。各组CK与LDH的活性随着时间的延长变化不大,差异不显著(P>0.05)。
  3 讨论
  3.1 富硒女贞子对山羊产奶量的影响
  产奶量是衡量奶畜泌乳性能高低最重要的指标,也是奶农收益的可靠保障。影响产奶量的因素有很多,概括起来主要包括2个方面:遗传因素和饲养管理条件。据测定,奶山羊产奶量的遗传力为0.3~0.35,因此,其产奶量的高低主要受饲养管理等环境因素的影响,而饲粮营养水平就是主要的环境因素之一。中草药一般含有多种营养成分,如维生素、矿物质、微量元素等,大多兼有营养与药用2种属性,在防病治病的同时,用作饲料添加剂可促进动物生长、提高生产性能。研究表明,日粮中添加1%的女贞子能显著提高产蛋鸡的产蛋量[3]。李庆试验发现,肌注复方微量元素注射液“生命元”能明显提高山羊日采食量,显著增加日增质量和降低料质量比[4]。张瑞霜等发现日粮中添加1%女贞子粉可使蛋鸡平均日产蛋量和产蛋率较对照组显著提高了20.09%和18.75%[5]。崔国强试验发现饲料中添加0.6 mg/kg的亚硒酸钠与0.8 mg/kg酵母硒组合对促进种母鸡采食量、提高产蛋率和蛋质量、降低料蛋比的效果最好[6]。吴显实研究发现日粮中添加富硒益生菌、益生菌或亚硒酸钠均能提高奶牛产奶量,且提高效果由高到低排序为:富硒益生菌组>益生菌组>亚硒酸钠组>对照组[7]。鲁玉花等报道日粮中补硒可极显著提高山羊的日增质量[8]。张春香等发现0.3 mg/kg硒水平可以促进山羊的生长和提高饲料的利用率[9]。
  本试验结果显示,饲料中添加各剂量富硒女贞子粉和普通女贞子粉均能提高山羊的产奶量,在试验1~7 d、22~38 d产奶量增长率由大到小的排序为:LSLL组>MSLL组>HSLL组>CLL组>C组。表明饲料中添加富硒女贞子粉、普通女贞子粉均能提高山羊产奶量,这可能是饲料中添加的富硒女贞子粉和普通女贞子粉中含有多糖、蛋白质、氨基酸、维生素、齐墩果酸等物质,可以补充和提高饲料的营养价值,进而提高山羊的生产性能。叶面喷施亚硒酸钠水溶液可提高作物对硒的生物利用率,植物通过自身的生理代谢,将生物活性低的无机硒转化成以硒蛋白、硒多糖为主的有机硒,从而提高了女贞子的营养价值和药效[10]。这是富硒女贞子提高山羊生产性能效果较普通女贞子好的原因。且每只山羊添加10 g富硒女贞子(硒的总含量为18.8 μg/g)的效果最好。此剂量是根据《中华人民共和国兽药典》(2010年版)中女贞子的剂量确定的推荐剂量,30、50 g/(头・d)是其推荐剂量的3、5倍。结果表明添加30、50 g/(头・d)富硒女贞子对山羊产奶量均有促进作用,但其作用与富硒女贞子剂量不呈正相关,且作用效果低于10 g/(头・d)。由此可见,日粮中添加10 g/(头・d)富硒女贞子的效果较好,且血液学、血清生化指标的试验结果均证明了这一结论。
  3.2 富硒女贞子对山羊血液学指标的影响
  血液是动物内环境的重要组成部分,参与动物新陈代谢,是体内代谢原料、废物运输及基础代谢反应进行的重要场所。红细胞通过血红蛋白运输O2、CO2和营养物质,对机体产生的酸性或碱性物质起缓冲作用;白细胞能刺激机体增强对外源抗原的抵抗力,反映机体免疫功能水平的高低。所以血液对动物来说是十分重要的,其成分的变化往往反映机体的代谢和健康情况。李庆试验发现,肌注复方微量元素注射液“生命元”能适度提高波尔山羊的白细胞数,显著提高其红细胞数和血红蛋白含量[4]。张春香等试验发现日粮中添加0.3、0.5 mg/kg亚硒酸钠组WBC显著升高,添加0.1、0.3 mg/kg 亚硒酸钠组RBC显著升高,改善了山羊的免疫状况[9]。
  本试验结果显示,饲料中添加富硒女贞子粉和普通女贞子粉能适度提高山羊的白细胞数,增强奶山羊抵抗力。饲料中添加普通女贞子粉组的红细胞数显著高于空白对照组,添加30 g/(头・d) 富硒女贞子粉和普通女贞子粉组的血红蛋白含量显著高于空白对照组。由此可见,饲料中添加 30 g/(头・d) 富硒女贞子粉和普通女贞子粉均能显著提高山羊的红细胞数和血红蛋白含量。此结果与上述报道一致。   3.3 富硒女贞子对山羊血清生化指标的影响
  血清生化指标的改变是组织细胞通透性发生改变和机体新陈代谢机能发生改变的反映,也是反映机体代谢状况最敏感的一类指标。
  血清总蛋白是由白蛋白和球蛋白2个部分组成,总蛋白含量高,有利于提高代谢水平和免疫力,促进动物健康快速生长。血清蛋白质是动物机体最主要的贮存蛋白质之一,在畜体氮素营养良好时能形成蛋白质的贮备。而当氮素不足时,贮存蛋白质则被动物机体用来维持重要的组织结构和代谢机能。因此,血清蛋白质对动物的生产性能具有重要的生理意义。本试验结果显示,7、38 d时富硒女贞子各剂量组和普通女贞子组的TP和ALB含量显著高于空白对照组,且富硒女贞子低剂量组效果最好。表明日粮中添加富硒女贞子和普通女贞子均能提高山羊血清TP和ALB的含量,即富硒女贞子和普通女贞子能加强山羊血清蛋白质合成代谢,促进山羊的生长发育,尤以10 g/(头・d)富硒女贞子效果最优。
  转氨酶是催化氨基酸与酮酸之间氨基转移的一类酶。普遍存在于动物、植物组织和微生物中,心肌、脑、肝、肾等动物组织中含量较高。ALT和AST反映了蛋白质合成和分解的状况。ALT主要是催化氨基酸在丙氨酸和谷氨酸之间转移,在非必需氨基酸的合成和蛋白质分解代谢中起重要的中介作用。AST催化谷氨酸与草酰乙酸之间的转氨作用,以心脏中活力最大,其次为肝脏。正常情况下血清ALT和AST活性很低,当这些组织细胞受损或通透性增大时,可有大量的ALT和AST溢入血清,造成血清中ALT和AST的活性升高。故可根据血清中ALT和AST活性的变化,作为诊断心、肝功能的指标之一[11]。本试验结果显示各试验组血清ALT和AST活性与空白对照组相比有降低趋势,14 d时富硒女贞子低剂量组的AST活性显著低于空白对照组,说明日粮中添加富硒女贞子和普通女贞子对山羊心脏和肝脏无损害,在一定程度上验证了其安全性。
  CK是一种器官特异性酶,以骨骼肌含量最高,其功能是催化三磷酸腺苷中的高能磷酸键转移到磷酸分子上,生成磷酸肌酸而贮存能量[12]。应激可使动物采食量下降、糖原降低,因肌肉功能不足而导致肌肉营养不良,从而使血液CK活性升高,故CK活性的升高是应激反应的一个重要特征。本试验各组的CK活性变化不大,差异不显著。表明富硒女贞子和普通女贞子对山羊血清的CK活性影响不明显。提示本试验期间山羊没有受到应激。
  LDH催化丙酮酸与L-乳酸之间的还原与氧化反应,是糖酵解和糖异生的主要酶之一,广泛存在于动物机体所有组织中,没有器官特异性。但肾、心肌、骨骼肌含量最为丰富,其次是肝、脾、胰及肺组织内较多。若器官或组织损伤,可释放LDH至血液中,血清该酶含量即见增高。本试验各组的LDH活性变化不大,差异不显著。表明富硒女贞子和普通女贞子对山羊血清的LDH活性影响不明显。提示本试验期间富硒女贞子和普通女贞子对山羊器官组织无损害。
  4 结论
  日粮中添加富硒女贞子、普通女贞子均能提高山羊产奶量,且添加10 g/(头・d)富硒女贞子的效果最好;添加30 g/(头・d) 富硒女贞子和普通女贞子能显著提高山羊的RBC和HGB含量,且均能提高血清中TP、ALB含量,降低了AST活性,但对山羊WBC、ALT、CK、LDH影响不明显。
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