几种药剂对香蕉枯萎病防治效果研究

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　　摘 要：香蕉枯萎病每年都给农业生产造成巨大损失，是一种难以防治的土传病害，危害性巨大，已成为香蕉产业发展的瓶颈。为保障香蕉产业的健康可持续发展，本文就香蕉枯萎病的药剂防治试验进行了研究，并对几种不同的药剂防治成效进行了分析，可为相关的香蕉枯萎病防治工作提供参考借鉴。
　　关键词：香蕉枯萎病;药剂;防治试验;效果
　　近年来，我国香蕉的种植规模在农业产业结构中不断扩大，成为农业经济发展的重要因素。但随着香蕉生产的发展，香蕉病害的危害也日益严重，尤其是香蕉枯萎病。其中，香蕉枯萎病是通过破坏香蕉维管束导致植株死亡的毁灭性病害，病菌腐生能力很强，在土壤中可长期存活，给我国香蕉生产带来极大威胁。如此，要最大程度上减少该病危害，必须从抗病药剂应用着手。
　　一、材料与方法
　　1.供试材料
　　（1） 病原菌株。香蕉枯萎病病原菌取自广东某蕉园，经病原分离、纯化、PCR鉴定和致病性接种鉴定，确认为尖孢镰刀菌古巴专化型（Fusarium Oxysporum f.sp.Cubense）1号生理小种（FOC1）。
　　（2） 供试生防菌株和杀菌剂及浓度。供试木霉菌株选用我们前期初步筛选的4个较好菌株（0026Ⅰ、0024Ⅱ、0018Ⅱ①和0023Ⅰ②）（广西大学农学院植物病理研究室提供）;生防菌剂“B9601-Y2菌剂”（云南农业大学植保学院提供）;杀菌剂为95%恶霉灵可溶性粉剂（北京北农绿亨科技发展有限公司生产）、50%多菌灵可湿性粉剂（上海升联化工有限公司生产）和50%咯菌晴可湿性粉剂（先正达公司生产）。
　　2.试验方法
　　（1）室内抑菌试验。病原菌和木霉菌株用PDA培养基在恒温（24℃±1）条件下培养1周后备用。
　　木霉菌株抑菌试验，同时接木霉菌株菌块（ΦO.5cm）和病原菌株菌块（Φ0.5cm），将木霉菌块放在病原菌块上。每个木霉菌株处理接种3皿，重复3次。
　　生防菌剂和杀菌剂抑菌试验，设生防菌剂“B9601-Y2菌剂”100倍液、200倍液和400倍液3个浓度;3个杀菌剂分别设100mg/L、200mg/L、400mg/L和800mg/L4个浓度。用无菌水按浓度比例配制成生防菌液和药液，用直径0.5cm无菌滤纸浸入菌液和药液，将带菌和药的滤纸放在病原菌块上（Φ0.5cm）。同样每个处理接皿，重复3次。
　　对照不接木霉、生防菌剂和杀菌剂。所有处理后，在恒温（24℃±1）条件下培养。
　　（2）盆栽防治试验。盆栽接种试验用西贡蕉组培杯苗（5～6叶）;盆栽用土壤均采自耕作层表层泥土，经高压（121～l24℃和0.11～0.13MPa）60min灭菌后装盆。
　　试验设生防菌剂“B9601-Y2菌剂”100倍液和200倍液2个浓度、95%恶霉灵可溶性粉剂1000倍液、50%多菌灵可湿性粉剂500倍液和50%咯菌腈可湿性粉剂500倍液及4个木霉菌株，共9个处理。
　　木霉菌液与病原菌悬浮液配制，木霉和病原菌株用PDA培养基培养，木霉菌株在培养10d（24士1℃）后，将每培养皿（Φ9cm）内的菌丝体及孢子调配成50mL菌液待用。而病原菌则在培养20d后，将每培养皿（Φ9cm）内的菌丝体及大、小型分生孢子调配成50mL悬浮液（主要是菌丝体）待用。
　　生防菌剂和木霉菌株处理，组培杯苗先用生防菌液和木霉菌液浸放20min再定植，定植1d后，全部处理再同时接病原菌，每盆（株）淋50mL病原菌悬浮液;杀菌剂处理则在定植后2d，淋50mL药液，对照不浸生防菌液、木霉菌液和不淋杀菌药液;每个处理5株，重复3次。1个月后调查病情。
　　（3） 田间防治试验。选上年发生过枯萎病的地块，并经采样检测，病原为FOC1，种植西贡蕉组培杯苗，植株长至15～16hi-时进行试验处理。设生防菌剂“B9601-Y2菌剂”100倍液和200倍液2个浓度、95%恶霉灵可溶性粉剂1000倍液、50%多菌灵可湿性粉剂500倍液和50%咯菌腈可湿性粉剂500倍液及4个木霉菌株，共9个处理。每个处理5株，重复3次。每株浇灌木霉菌液、生防菌液或药液2L;木霉菌液则是用PDA培养基培养10d后，将5个培养皿（Φ9cm）内的菌丝体及孢子调配成2L菌液;对照淋清水，每15d淋施1次，连续3次。第三次药后1个月调查病情。
　　3.调查方法
　　（1）室内抑菌试验调查方法。接种病原菌后7d，分别测量每处理各皿病原菌菌落4个方向直径，计算菌落半径平均增长值（cm），统计每个重复和处理菌落半径平均增长值，抑菌效果按以下公式计算，并进行差异性分析。
　　
　　抑菌效果= 100
　　
　　（2）盆栽防治试验调查方法。接菌1个月后，观察植株叶黄化症状，纵剖茎基部，按以下分级标准记录各株病情等级，并计算各重复和处理病情指数及防治效果。
　　①调查分级标准：
　　0级：植株叶片无黄化症状呈现;剖开假茎和球茎，无褐色病变症状。
　　1级：植株下部叶片黄化症状初呈;剖开假茎和球茎，初呈轻度褐色病变症状。
　　3级：植株下部叶片黄化症状呈现明显;剖开假茎和球茎，可见明显的褐色病变症状。
　　5级：植株下部及中部叶片黄化症状极为明显;剖开假茎和球茎，褐色病变严重，褐变组织开始相连成块。
　　7级：植株下部叶片黄化干枯，中上部叶片黄化症状极为明显;剖开假茎和球茎，假茎褐变组织相连成条，球茎病变组织连成块，部分成黑褐色。
　　② 防效计算：
　　（3）田间防治试验查方法调查分级标准同1.3.2.1，但不剖开假茎和球茎。防效计算方法同1.3.2.2。
　　二、结果与分析
　　1.室内抑菌试验。木霉菌株、生防菌剂和杀菌剂抑菌效果见表1。结果表明，生防菌剂B9601-Y2菌剂100倍液和200倍液、木霉菌株0026I和50%多菌灵800mg/L和400mg/L处理抑菌效果在85.0%以上;木霉菌株0024Ⅱ、0018Ⅱ①和0023Ⅰ②，B9601-Y2菌剂400倍液、多菌灵（200mg/L和100mg/L）及50%咯菌腈800mg/L处理抑菌效果在70.0%～85.0%;而其他处理抑菌效果相对较低。生防菌剂和杀菌剂抑菌效果随着浓度的增加而提高。 　　表1 木霉菌株、生防菌剂和杀菌剂抑茵效果
　　注：表中大小写字母分别表示1%和5%水平差异显著性（下同）。
　　2.盆栽防治试验。盆栽试验结果（表2）表明，处理后1个月，以B9601-Y2菌剂100倍液处理防效较好，其次是B9601-Y2菌剂200倍液处理，防效均达70%以上，其他处理防效则<70%。处理后2个观察，各处理病情都加重，但仍可发现B9601-Y2菌剂100倍液处理，病情相对较轻。这可能是盆栽用土经高温高压处理后，相关的营养元素可能被钝化及土中有益微生物可能被杀灭，影响到木霉菌株和生防菌剂作用的发挥。
　　表2 盆栽防治试验结果
　　3.田间防治试验。田间试验结果（表3）表明，B9601一Y2菌剂100倍液处理表现相对突出，然而防效也仅达70%，B9601-Y2菌剂200倍液和50%多菌灵500倍液处理防效则为60%左右;木霉菌株0026I处理防效仅达56.39%，其他处理防效均在50%以下。第三次施药后45d观察，各处理病情都进一步加重，发病率在90%以上，但仍以B9601一Y2菌剂100倍液处理病情相对较轻。同时也表明各处理对香蕉枯萎病菌的防控持效期较短。田间防治试验结果与盆栽防治试验结果基本一致，防效偏低。这说明，在田间生态条件下，木霉菌株、生防菌剂效果受到田间较多方面因素的影响，在田间的适宜施用条件值得进一步探索。
　　表3 田间防治试验结果
　　三、讨论及建议
　　1.综合抑菌试验、盆栽和田间防治试验结果表明，在供试的生防菌剂、木霉菌株和杀菌剂中，杀菌剂防效相对较低;生防菌剂“B9601-Y2”防效表现相对突出，可考虑应用于大田防治香蕉枯萎病;木霉菌株0026Ⅰ防效表现也不错，可考虑作为进一步开发应用的生防菌。
　　2.生防菌在田间应用中，将受到土壤有机质、温湿条件、pH值、微生物种类群落及其相互作用等多种环境因素的影响，相关影响因子值得深入研究和探讨。
　　3.在室内抑菌试验中，观察到木霉菌株生长均较病原菌快，并有溶菌现象出现，说明对病原菌有较强的抑制作用。如何培育适宜木霉菌株和生防菌在土壤中定殖和生长的关键生态条件，还有待深入探讨和研究。
　　4.在田间应用木霉菌株或生防菌防控香蕉枯萎病上，建议先施木霉菌株或生防菌到土壤中或用组菌苗育杯苗时，先用木霉菌或生防菌液浸幼苗根部，使木霉菌或生防菌首先在植株根系周围定殖，形成群落或群体，以发挥更好的抑菌或防病效果。
　　参考文献：
　　[1] 王清红;李培征.香蕉枯萎病生物防治研究进展[J].安徽农业科学.2010（20）.
　　[2] 刘亚.木霉菌防治香蕉枯萎病试验及相关因子研究[D].植物病理学.2009.
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