大枣有效成分含量测定研究进展

作者:未知

  摘要:大枣中含有多种生物活性物质,对大枣中有效成分含量进行测定具有重要意义。在查阅、收集国内相关文献资料基础上,综述近几年大枣有效成分含量测定的研究进展,以期为进一步开展大枣研究提供参考。
  关键词:大枣;有效成分;含量测定;研究进展
  中图分类号:R284.2    文献标识码:A    文章编号:1674-1161(2020)01-0060-03
   大枣是鼠李科植物枣树的成熟果实,别名红枣、干枣、枣子等,味甘,性平,具有补中益气、养血安神功效,既是常用的中药材,又是一种营养极其丰富的食品,即药食同源。大枣中含有环磷腺苷、黄酮类、皂苷类、三萜类、生物碱类等多种生物活性物质。近年来,针对大枣中有效成分含量测定进行了大量的研究和应用,取得了许多有价值的研究成果。大枣有效成分含量测定方法有高效液相色谱法、反相高效液相色谱法、紫外分光光度法、高效液相色谱—蒸发光散射法、高效毛细管电泳法、亲水色谱—二极管阵列检测器—电喷雾四极杆飞行时间质谱法、液相色谱—质谱联用法、离子色谱法和一测多评法等。本课题综述各种测定方法的研究进展,以期为进一步开展大枣研究提供參考。
  1 高效液相色谱法
   李环研究优化高效液相色谱法测定大枣中芦丁含量的效果。该方法测定时的标准为:MACHEREY-NAGEL(MN)NUCLEODUR 100-5 C18柱(BATCH2064),流动相为乙腈∶0.05%磷酸(0.15∶0.85),流速1.0 mL/min,波长257 nm,柱温40 ℃。结果表明:芦丁含量的线性范围为0.050 55~0.404 40 μg,相关系数r=0.998 7,加样回收率为97.06%。上述结果符合相关的标准,RSD=1.3%(n=6)。采用优化高效液相色谱法测定大枣中芦丁含量,效果准确,且能避免糖类成分对测定结果的干扰。
   刘世军等人研究采用高效液相色谱法同时测定大枣中齐墩果酸和白桦脂酸的方法。色谱柱为Hyperil BDS C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇∶水(85∶15),检测波长210 nm,柱温25 ℃。结果表明:齐墩果酸、白桦脂酸在0.008~0.200 mg/mL时呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为101.25%,101.64%,RSD分别为2.44%,1.25%。该方法操作简单,测定准确,重复性好。
   侯广月等人建立大枣中齐墩果酸、熊果酸、环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷测定的高效液相色谱法。试样经乙腈—水在60 ℃超声提取,过滤后选用Waters Symmetry ShieldTMRP18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分离,流动相为乙腈∶0.1%甲酸水,流速为1.0 mL/min,柱温为30 ℃,二极管阵列检测器检测,外标法定量。结果表明:齐墩果酸线性范围为1.2~90.0 μg/mL,熊果酸线性范围为1.0~75.0 μg/mL,环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷线性范围为1.0~100.0 μg/mL,相关系数均>0.999,定量限为1.0~1.2 μg/mL。平均回收率为85%~115%;日内和日间相对标准偏差均≤5.470%。该方法简便、快速、准确,适用于大枣中齐墩果酸、熊果酸、环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷的测定。
  2 紫外分光光度法
   李莲芳等人建立大枣中总黄酮含量的测定方法。以芦丁为对照品,在275 nm波长下测定总黄酮在三氯化铝甲醇溶液中的吸光度,计算大枣中总黄酮含量。该方法简便易行,适用于大枣中总黄酮含量的测定。
  3 液相色谱—质谱联用法
   液相色谱—质谱联用法(HPLC—MS)能提高大枣中白桦脂酸、齐墩果酸和熊果酸含量分析的选择性和灵敏度。
   张勇等人采用液相色谱—质谱联用法测定大枣中脂酸、齐墩果酸和熊果酸三萜酸的含量。选用聚合物键合的ODS色谱柱Ulti-mate XB-PAH色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)进行分离,以乙腈∶水(90∶10)为流动相,电喷雾质谱负离子选择离子模式检测。结果表明:所建立的检测方法灵敏度高(50.8~113.9 pg),分离度高(R≥1.7),线性关系良好(r≥0.999 0),重复性好(RSD≤3.5%)。聚合物键合的ODS固定相可对三萜酸同分异构体进行高效分离,且HPLC—MS对三萜酸含量分析的专属性和灵敏度较高。
  4 高效液相色谱—蒸发光散射法
   曲枫等人采用高效液相色谱—蒸发光散射法(HPLC—ELSD)同时测定大枣多糖酸性条件下水解产物中阿拉伯糖和D-半乳糖含量。结果表明:样品中阿拉伯糖和D-半乳糖分离良好,分别在2.00~10.00 μg(r2=0.995 7)和2.08~10.40 μg(r2=0.990 3)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为103.87%(r2=5.42%,n=9)和93.04%(RSD=4.90%,n=9)。
  5 亲水色谱—二极管阵列检测器—电喷雾四极杆飞行时间质谱法
   亲水色谱法采用极性材料作为固定相,适合极性化合物的保留和分离;电喷雾四极杆飞行时间质谱能够提供化合物母离子和子离子的精确分子量,从而推断分子式。多种检测方法联合应用,具有较好的分离度、灵敏度,可实现大枣中环磷腺苷的准确、快速鉴别和定量测定。
   赵恒强等人研究建立超声辅助提取—亲水色谱—二极管阵列检测器—电喷雾四极杆飞行时间质谱法(UAE—HILIC—DAD—ESI—Q—TOF/MS)定量测定大枣环磷酸腺苷(cAMP)的方法。采用超声辅助提取,选用Waters Xbridge Amide(250 mm×4.6 mm,3.5 μm)亲水色谱柱进行分离,以乙腈和20 mmol/L CH3COONH4+0.2% CH3COOH为流动相,流速为0.8 mL/min,柱温为室温。结果表明:在优化的亲水色谱条件下,大枣水提物中cAMP与其他化合物分离良好。根据母离子和子离子的精确分子量信息,结合标准对照品的保留时间和UV信息可对其进行准确鉴别。cAMP在0.01~50.00 μg/mL范围内具有良好的线性关系。   6 高效毛細管电泳法
   高效毛细管电泳法具有灵敏度高、准确度高、简便、快速等特点。
   高瑞斌等人采用高效毛细管电泳法同时测定大枣中环磷酸腺苷、芹菜素及槲皮素,研究缓冲液浓度、pH值、β-环糊精浓度、检测波长、分离电压对分离结果的影响。结果表明:在最佳分离测定条件下,环磷酸腺苷、芹菜素及槲皮素快速分离,分别在16.5~529.4 mg/L,5.5~176.4 mg/L,8.8~282.4 mg/L范围内线性关系良好,r值分别为0.999 8,0.999 8,0.999 7,加样回收率分别为97.31%,95.62%,94.88%。
  7 离子色谱法
   庄红艳等人建立一种检测枸杞子和大枣中甜菜碱含量的直接离子色谱法。选用Thermofisher Ion Pac CS19(250 mm×4 mm)阳离子交换色谱柱和CG19(50 mm×4 mm)阳离子保护柱,以甲基磺酸(MSA)为流动相等度洗脱,流速为1.0 mL/min。结果表明:枸杞子和大枣中的甜菜碱在10 min内完成分离检测,甜菜碱质量浓度在10~500 mg/L内具有良好的线性关系(r2=0.999 7),最低检出限为1.8 mg/L,保留时间和峰面积的RSD(n=6)分别为0.15%和1.70%。该方法测定甜菜碱含量灵敏度高、重现性好、检测过程简便,具有较高的实用和推广价值。
  8 一测多评法
   近年来,基于只测定1个成分而实现对多个目标成分进行同步监控的一测多评法(QAMS)已广泛应用于中药材的含量测定。
   郭盛等人采用HPLC—ELSD技术,以白桦脂酸对照品为内参物,测定其与齐墩果酸、熊果酸、桦木酮酸、齐墩果酮酸、熊果酮酸的相对校正因子,利用相对校正因子计算三萜酸类化学成分的量;同时比较外标法所测得的大枣药材中这6种化学成分的实际值与经QAMS所得的计算值之间的差异,以验证QAMS的适用性、可行性和重复性。结果表明:相对校正因子的重现性较好,15批大枣药材样品中6种三萜酸类化学成分的QAMS计算值与外标法实测值之间无显著性差异。该方法操作简便,测定结果准确。
  参考文献
  [1] 李环.用优化高效液相色谱法测定大枣中芦丁含量的效果研究[J].当代医药论丛,2017,15(3):1-2.
  [2] 刘世军,吴三同,唐志书,等.HPLC法测定大枣中齐墩果酸、白桦脂酸含量[J].西部中医药,2017,30(2):23-24.
  [3] 侯广月,翟中华,周莉莉,等.高效液相色谱法测定大枣中齐墩果酸、熊果酸、环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷[J].中国卫生检验杂志,2018,28(13):1 548-1 551.
  [4] 李莲芳,杨丽莉,龙艳昆,等.紫外分光光度法测定大枣中总黄酮的研究[J].云南中医中药杂志,2019,40(8):75-77.
  [5] 庄红艳,姜振邦,潘广文,等.离子色谱法测定枸杞子和大枣中甜菜碱含量[J].中华中医药杂志,2017,32(9):4 263-4 265.
  Abstract: Jujube contains a variety of bioactive substances, and the determination of active components in jujube is of great significance. On the basis of consulting and collecting relevant domestic literature, this paper summarizes the research progress of the determination of active ingredients of jujube in recent years, in order to provide reference for further research on jujube.
  Key words: jujube; active ingredients; content determination; research progress
转载注明来源:https://www.xzbu.com/1/view-15162884.htm

服务推荐