白藜芦醇联合运动对废用性骨质疏松大鼠骨密度的影响

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　　摘  要：目的：观察白藜芦醇联合运动对废用性骨质疏松大鼠骨密度的影响。方法：将40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、白藜芦醇组、白藜芦醇+运动组，每组10只。白藜芦醇组建模后给予200mg/ （kg·d）白藜芦醇4周;白藜芦醇+运动组建模后给予200mg/（kg·d）白藜芦醇并进行运动训练4周;对照组和模型组灌同等体积的蒸馏水。即时取材检测大鼠血清钙磷和骨密度指标。结果：模型组的血清钙磷、骨密度分别高于和低于白藜芦醇+运动组、白藜芦醇组（P<0.05）;白藜芦醇+运动组血清钙磷、骨密度分别低于和高于白藜芦醇组（P>0.05）。结论：白藜芦醇联合运动对废用性骨质疏松有更为积极的防治作用。
　　关键词：白藜芦醇  运动  废用性骨质疏松  骨密度
　　中图分类号：G80-05                             文献标识码：A                         文章编号：2095-2813（2020）05（a）-0226-03
　　Abstract： Objective： To observe the effect of resveratrol combined exercise on bonel density in rats with disused osteoporosis. Methods： 40 SD rats were randomly divided into control group， model group， resveratrol group and resveratrol+exercise group， with 10 rats in each group. Resveratrol was given at 200mg/ （kg·d） for 4 weeks after the resveratrol molding. After the resveratrol+exercise module， 200mg/ （kg·d） resveratrol was given and exercise training was conducted for 4 weeks. The control group and the model group were given the same volume of distilled water. Calcium， phosphorus and bone density of rat serum were measured by instant sampling. Results： Serum calcium and phosphorus and bone density in the model group were higher and lower than that in the resveratrol+exercise group and the resveratrol group （P<0.05）.The serum calcium and phosphorus and bone density of the resveratrol+exercise group were lower and higher than that of the resveratrol group（P>0.05）. Conclusion： Resveratrol combined exercise has a more active effect on the prevention and treatment of disuse osteoporosis.
　　Key Words： Resveratrol; Exercise; Disuse osteoporosis; Bone density
　　废用性骨質疏松（disuse osteoporosis，DOP）是机械载荷应力对骨的作用减少引起骨量丢失和骨微观结构退化，从而导致骨脆性增大且易发生骨折的一种骨骼疾病。近年来天然植物药在防治骨质疏松方面有着良好的应用前景[1]。白藜芦醇（Resveratrol， Res）是一种植物天然多酚，具有抗氧化、抗炎、雌激素样等众多药理作用，研究发现白藜芦醇对骨质疏松具有保护作用[2]。外界载荷应力刺激（运动）在骨重建过程中起着非常重要的作用，研究表明，跑台运动对废用性骨质疏松有良好的康复作用[3]。本研究以腿尾固定法建立废用性骨质疏松模型，探讨白藜芦醇联合运动对废用性骨质疏松的防治作用和效果。
　　1  材料与方法
　　1.1 实验分组及模型制备
　　实验大鼠均由西安交通大学医学部动物实验中心提供，体质量280～320g，许可证号：SCXK（陕）2017-009。分笼饲养，室温 （22±5）℃，湿度60%～65%，自由饮水。将40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、白藜芦醇组、白藜芦醇+运动组，每组10只。对照组安静饲养不作任何特殊处理，其他3组均采用腿尾固定法建立废用性骨质疏松模型[4]。
　　1.2 实验方法
　　对照组和模型组同时给予同等体积的蒸馏水，白藜芦醇组和白藜芦醇+运动组给予200mg/（kg·d）白藜芦醇混悬液灌胃，白藜芦醇+运动组同时进行运动训练。对照组安静饲养4周后处死取材冻存;模型组腿尾固定4周建模，建模后即刻处死取材并冻存;白藜芦醇组腿尾固定4周建模，建模后即日给予200mg/（kg·d）白藜芦醇混悬液灌胃，4周后处死取材冻存;白藜芦醇+运动组腿尾固定4周建模，建模后即日给予200mg/ （kg·d）白藜芦醇混悬液灌胃，并进行4周的跑台运动训练（方案：跑台坡度为0°，跑速为13m/min，1次/d，40min/次，6次/周），4周后处死取材冻存。 　　1.3 主要试剂及仪器
　　主要试剂：白藜芦醇（Sigma公司，批号：R5010100112K52
　　16）。主要仪器：Prodigy双能X线骨密度仪（GE公司，美国）;全自动生化分析仪（Toshiba公司，日本）。
　　1.4 血清钙磷和骨密度检测
　　腹主动脉采取血样，低温5000r/min离心10min，取上层血清，-80℃冻存待测。全自动生化分析仪对各组大鼠血清钙、血清磷进行检测。实验所取股骨和椎骨（4、5腰椎）放置于冻存管中（-20℃）保存，检测前自然解冻，采用双能X线骨密度仪检测大鼠离体右侧股骨和椎骨的骨密度。
　　1.5 统计学处理
　　所有实验数据均采用SPSS 22.0软件进行统计处理，结果以（）表示，组间比较采用t检验，P<0.05表示为有统计学意义。
　　2  结果
　　2.1 血清钙磷检测
　　表1检测结果显示：模型组血清钙、血清磷指标明显高于对照组、白藜芦醇组、白藜芦醇+运动组，差异具有显著性（P<0.05）。白藜芦醇+运动组和白藜芦醇组血清钙、血清磷指标均高于对照组，差异不具有显著性（P>0.05）;白藜芦醇+运动组血清钙、血清磷指标分别低于白藜芦醇组，差异不具有显著性（P>0.05）。
　　2.2 骨密度检测
　　表2检测结果显示：模型组右侧股骨和椎骨骨密度明显低于对照组、白藜芦醇组、白藜芦醇+运动组，差异具有显著性（P<0.05）。白藜芦醇+运动组和白藜芦醇组右侧股骨和椎骨骨密度均低于对照组，差异不具有显著性（P>0.05）;白藜芦醇+运动组右侧股骨和椎骨骨密度高于白藜芦醇组，差异不具有显著性（P>0.05）。
　　3  讨论
　　废用性骨质疏松（DOP）是外界机械应力刺激减少而引起局部或全身骨量丢失所导致的一种继发性骨质疏松症。长期卧床、制动、脊髓损伤以及失重引起的废用性骨质疏松发生率高达81%、骨折发生率更是达到了1%～39%[5]，对患者及家庭、社会造成了巨大的负担，因此，废用性骨质疏的防治越来越受到人们的关注。近年来研究发现白藜芦醇对多种骨质疏松症良好且积极的防治作用，但其在防治废用性骨质疏松方面的作用鲜见报道。另有研究显示，废用性骨质疏松多发于活动中受更多机械应力刺激的骨组织[6]。运动能够对骨组织施加更多的外界机械应力刺激，可有效促进废用性骨质疏松症的恢复[7]。
　　机体骨代谢是不断通过骨形成和骨吸收的重复来维持骨质，骨质疏松则是这一生物动态调节失衡的结果，对血清钙磷和骨密度的检测有利于及早发现并防治废用性骨质疏松。血清钙磷是骨盐代谢的主要指标，正常情况下血清中钙磷与骨骼中的钙磷保持动态平衡，其正常代谢决定骨的矿物质含量，而含量的测定能反映出骨组织代谢情况。骨密度是评价骨质量以及衡量骨强度的重要指标，其可预测骨折风险。本研究通过对实验各组大鼠血清钙磷以及右侧股骨、椎骨的离体骨密度进行检测后显示：模型组血清钙和磷指标明显高于对照组、白藜芦醇组、白藜芦醇+运动组，而其骨密度指标明显低于其他3组，以上均具有显著性差异（P<0.05）;白藜芦醇+运动组和白藜芦醇组血清钙和磷指标均高于对照组、骨密度指标均低于对照组（P>0.05）;白藜芦醇+运动组血清钙和磷指标分别低于白藜芦醇组、骨密度指标高于对照组（P>0.05）。研究结果表明，白藜芦醇和白藜芦醇联合运动均对废用性骨质疏松有良好的防治效果，但白藜芦醇联合运动要优于白藜芦醇的防治效果，进而表明运动与白藜芦醇在防治废用性骨质疏松方面具有良好的协同作用。
　　参考文献
　　[1] An J，Hao D，Zhang Q，et al.Natural products for treatment of bone erosive diseases： The effects and mechanisms on inhibiting osteoclastogenesis and bone resorption[J].Int Immunopharmacol，2016（36）：118-119.
　　[2] 陈楠，饶嘉，李成江.白藜蘆醇抗骨质疏松的研究机制进展[J].中国校医，2019，33（5）：392-395.
　　[3] 马涛，贾磊，苏红燕.运动对废用性骨质疏松大鼠破骨细胞分化JNK/AP-1信号通路的影响[J].西安体育学院学报，2017，34（5）：599-606.
　　[4] 王莲朋，丁慧勇，韩亚军，等.腿尾固定法建立SD大鼠废用性骨质疏松症模型的评价[J].新疆医科大学学报，2017，40（3）：334-336.
　　[5] Hammond ER，Metcalf HM，Mcdonald JW，et al.Bone mass in individuals with chronic spinal cord injury： associations with activity-based therapy， neurologic and functional status，a retrospective study[J].Arch Phys Med Rehabil，2014，95（12）：2342-2349.
　　[6] GROVER K，LIN L，HU M，et al.Spatial distribution and remodeling of elastic modulus of bone in micro-regime as prediction of early stage osteoporosis[J].J Biomech，2016，49（2）：161-166.
　　[7] 马涛，王通.运动对废用性骨质疏松大鼠骨代谢和破骨细胞分化OPG-RANKL-RANK系统的影响[J].中国运动医学杂志，2017，36（7）：578-585.
　　[8] 葸慧荣，高玉海，杨芳芳，等.藜芦醇对生长期大鼠峰值骨量的影响[J].浙江大学学报：医学版，2017，46（6）：578-584.
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