荧光分光光度计是一种用于测量荧光光谱的仪器。它的原理是利用荧光分子受到激发后发出的特定波长的荧光辐射来测量样品中的化合物浓度。荧光分光光度计的原理图如下:
首先,荧光分光光度计通过一个光源(例如氙灯或汞灯)产生激发光。这些光线经过准直器和滤光片,只有一定波长的光线通过。这些光线穿过一个分光器,被分成两个光束:参考光和样品光。
参考光和样品光进入荧光池(荧光物质的溶液),激发荧光分子。荧光分子吸收激发光并被激发到更高的能级。在返回基态时,荧光分子通过发射荧光辐射来释放能量。这个荧光辐射与激发光波长不同,因此需要一个滤光片来过滤掉激发光。
样品光和参考光再次通过分光器,进入检测器。检测器测量两束光的强度,计算出样品中荧光物质的浓度。
荧光分光光度计的优点是具有高灵敏度和选择性,可以在低浓度下检测到荧光物质。同时,它还可以测量在不同波长下的荧光光谱,提供更多的化学信息。这使得荧光分光光度计在生物、医学、环境、食品等领域中得到广泛应用。
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