仙鹤草不同提取部位对抗炎作用的研究
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作者:孟庆婷 朱自仙 杨艳 凌完成 唐当柱
摘要：目的 考察仙鹤草不同提取部位的抗炎作用。方法 采用醋酸扭体法、二甲苯致小鼠耳肿胀法、磷酸组胺致毛细血管通透性增加实验，探讨仙鹤草醇提取部位、仙鹤草正丁醇提取部位、仙鹤草乙酸乙酯提取部位的抗炎作用。结果 与模型组比较，仙鹤草醇提取部位、正丁醇提取部位能减少醋酸所致小鼠扭体次数（P<0.05、P<0.05）、能抑制二甲苯致小鼠耳肿胀（P<0.05、P<0.05），能够降低磷酸组胺致小鼠毛细血管通透性增加（P<0.05、P<0.05）。结论 仙鹤草具有明显的抗急性炎症的作用，其活性主要集中于正丁醇提取部位。
关键词：仙鹤草;有效提取部位;抗炎
中图分类号：R285 文献标志码：A 文章编号：1007-2349（2020）01-0064-03
【Abstract】Objective： To study the anti-inflammatory effect of different extracted parts of Agrimonia. Methods： The experiments of acetic acid writhing method， xylene-induced ear swelling in mice， and histamine phosphate-induced increase in capillary permeability were used to explore the anti-inflammatory effects of the different parts of Agrimonia for the extraction of alcohol， n-butanol and the ethyl acetate. Results： Compared with the model group， the parts of alcohol and n-butanol could reduce the number of writhing in mice caused by acetic acid （P<0.05， P<0.05）， and could suppress xylene-induced ear swelling in mice （P<0.05， P<0.05）， and reduce the increase of capillary permeability in mice induced by histamine phosphate （P<0.05， P<0.05）. Conclusion： Agrimonia has obvious anti-inflammatory effect and its activity is mainly concentrated in the part of n-butanol extraction.
【Key words】Agrimony， effective extraction part， anti-inflammatory
仙鹤草又名脱力草、龙牙草，具有收敛止血、截疟、止痢、解毒、补虚功效，临床上常用于咯血、吐血等各种出血症[1]。研究表明仙鹤草醇提取物具有一定的镇痛抗炎作用[2]，但其主要活性部位尚不清楚，为探讨其主要活性部位，本研究对仙鹤草采用极性分离法得到的仙鹤草醇提取物、正丁醇提取物及乙酸乙酯提取物，采用醋酸致小鼠扭体法、二甲苯致小鼠耳肿胀法及磷酸组胺致毛细血管通透性增加实验，对仙鹤草不同提取部位进行抗炎作用的研究，现将研究结果报道如下。
1 材料
1.1 实验动物 SPF级，昆明种小鼠雌雄各半，18-22 g，许可证号：SCXF（辽）2015-0001。
1.2 药物及试剂 布洛芬片，云南植物药业有限公司（批号：20161002）;磷酸组胺，上海生工生物工程股份有限公司（批号：B326BA1896）;氢化可的松，上海麦克林生化科技有限公司（批号：C10113013）;伊文思兰，sigma（批号：MKCB2532V）。
1.3 实验仪器 旋转蒸发仪，型号：RE—501，山东博科科学仪器有限公司。
2 实验方法
2.1 仙鹤草不同提取物的制备 取仙鹤草1000 g，采用70%乙醇回流提取3次，每次提取时间分别为3 h、2 h、1h共计5h，合并三次滤液，使用旋转蒸发仪回收乙醇、真空干燥得乙醇提取部位100.10 g;取部分仙鹤草醇提取部位用超纯水均匀分散，以等体积乙酸乙酯连续萃取6次，合并上层滤液，回收下层溶液浓缩干燥得乙酸乙酯提取部位25.15 g;上层滤液用等体积正丁醇萃取6次，浓缩干燥得正丁醇提取部位24.85 g。
2.2 对醋酸致小鼠扭体反应的影响 选择健康昆明种小鼠（18-22 g）100只，随机分为5组，每组20只，分别为模型组（超纯水）、阳性药组（布洛芬，104 mg/Kg）、仙鹤草组（仙鹤草醇提取部位、正丁醇提取部位、乙酸乙酯提取部位，40 g生药/kg），每组雌雄各半，给药1h后腹腔注射0.6%冰醋酸0.2 mL/只，观察小鼠扭体反应，并记录小鼠记录小鼠15 min内出现的扭体次数，计算小鼠疼痛的抑制率，疼痛抑制率=（模型组扭体次数-给药组扭体次数）/模型组扭体次数×100%[3]。
2.3 仙鹤草不同提取物的抗炎作用
2.3.1 对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响 给药方法、分组及剂量同“2.2项”，阳性组给予氢化可的松（20 mg/Kg），各组给药后1h，分别精密吸取二甲苯10 uL均匀涂布于各组小鼠右耳上、下两面，左耳不涂作自身对照。于涂耳30 min后处死小鼠，沿小鼠耳廓基线剪下两耳，采用6 mm直径打孔器于左右耳对称部位打下耳片，用精密电子天平称取耳质量，计算耳肿胀度和耳肿胀抑制率。小鼠耳肿胀度=（右耳質量-左耳质量）/左耳质量×100%]。小鼠耳肿胀抑制率（%）=（模型组耳肿胀度-给药组耳肿胀度）/模型组耳肿胀度×100%[4]。
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