铁皮石斛对小鼠急性酒精性肝损伤模型SOD\MDA\GSH-Px的影响

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　　关键词 鲜铁皮石斛 铁皮枫斗 急性酒精性肝损伤 SOD MDA GSH-Px 小鼠
　　
　　2005年版《中华人民共和国药典》记载:铁皮石斛为兰科植物铁皮石斛的新鲜或干燥茎,鲜铁皮石斛剪去部分须根后,边炒边扭成螺旋形,烘干,习称铁皮枫斗。我们的前期实验研究表明,铁皮石斛和铁皮风斗能够改善急性酒精性肝损伤小鼠的血清和肝功能相关指标。现代医学认为,酒精在肝脏代谢过程中会使活性氧形成增加和抗氧化物减少,从而导致脂质过氧化增加。故本实验观察了铁皮石斛对急性酒精性肝损伤模型小鼠超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的影响。
　　
　　1 材料与方法
　　
　　1.1 实验动物:ICR小鼠,雄性,25~30g。浙江省实验动物中心提供。合格证号:SCXK(浙)2003-0001。
　　1.2 受试药:鲜铁皮石斛、铁皮枫斗经鉴定为兰科植物铁皮石斛的新鲜或干燥茎。取鲜铁皮石斛提取原液,分别稀释成浓度为含生药量0.30g/ml、0.60g/ml、0.90g/ml的药液;取铁皮枫斗提取原液,分别稀释浓度为含生药量0.045g/ml、0.090g/ml、0.135g/ml的药液。均4℃冷藏保存。
　　1.3 分组及实验:雄性ICR小鼠,分为3个鲜铁皮石斛组(3g/kg、6g/kg、9g/kg)、3个铁皮枫斗组(0.45g/kg、0.90/kg、1.35g/kg)、正常对照组、模型对照(红星二锅头酒)组、阳性对照(联苯双酯滴丸)组,共9组。各组动物每日灌胃1次,灌胃容积均为0.1ml/10g体重,连续14天。正常对照组和模型对照组给予水;鲜铁皮石斛3个受试组分别灌胃给予0.30g/ml、0.60g/ml、0.90g/ml鲜铁皮石斛提取物;铁皮枫斗3个受试组分别灌胃给予0.045g/ml、0.090g/ml、0.135g/ml铁皮枫斗提取物。末次给药后2h,除正常对照组外,其余各组按16ml/kg体重灌胃给予56度白酒造成急性酒精肝损伤模型。
　　1.4 观察指标:灌胃给予酒精后禁食不禁水,12h后摘眼球取血,4000r/min离心15min,取血清备测SOD、MDA。迅速摘取肝脏,称量肝脏精确至0.5g,用生理盐水制作成10%的肝匀浆,备测肝组织SOD、MDA、GSH-Px。
　　1.5 统计学处理:实验数据以x±s表示,组间差异采用t检验。
　　
　　2 结果
　　
　　2.1 对酒精性肝损伤小鼠血清和肝组织SOD的影响:见表1。
　　
　　表1显示,与正常对照组比较,模型对照组小鼠血清和肝组织SOD显著性降低(P<0.01)。与模型对照组比较,铁皮枫斗(0.45g/kg、0.90g/kg、1.35g/kg)与鲜铁皮石斛(3g/kg)均能明显升高血清和肝组织SOD(P<0.05,P<0.01);鲜铁皮石斛(6g/kg)能升高血清SOD(P<0.01)。
　　2.2 对酒精性肝损伤小鼠血清和肝组织中MDA的影响:见表2。
　　
　　表2显示,与正常对照组比较,模型对照组小鼠血清和肝组织MDA均有显著性升高(P<0.01)。与模型对照组比较,鲜铁皮石斛(3g/kg、6g/kg)与铁皮枫斗(0.45g/kg、0.90g/kg)能降低血清和肝MDA(P<0.05,P<0.01),鲜铁皮石斛(9g/kg)能降低血清MDA(P<0.01)。
　　3.3 对酒精性肝损伤小鼠肝组织GSH-Px的影响:见表3。
　　
　　表3显示,与正常对照组比较,模型对照组小鼠肝组织GSH-Px均有显著性降低(P<0.01)。与模型对照组比较,鲜铁皮石斛(3g/kg、6g/kg)与铁皮枫斗(0.45g/kg、0.90g/kg、1.35g/kg)均能提高肝组织中的GSH-Px(P<0.05,P<0.01)。
　　
　　3 讨论
　　
　　中医学认为酒性温,味甘、苦、辛,为大热有毒之品。嗜酒者湿热偏胜而酿痰生火;酒性喜升,升则气必随之耗散(伤气/伤脾胃);酒性大热,入血分而“动血”(伤血/伤肝);酒气味俱阳,耗气损精(伤肾)。过量饮酒,耗气动血损精而致肝阴虚亏,不足以制阳,则肝阳偏亢[1]。
　　现代医学认为,酒精摄入导致脂质过氧化增加。大量摄入酒精经过代谢产生乙醛,这个过程中均有活性氧生成。由于活性氧积聚,使肝组织的抗氧化物质消耗增加,超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶水平下降。同时乙醛本身能与GSH-Px的巯基以及抗氧化酶蛋白结合,使GSH-Px水平下降,机体内源性抗氧化能力减弱,难以清除过多的自由基。当生成的活性氧量超过了超氧化物歧化酶SOD或GSH-Px等抗氧化因子的清除能力时,肝细胞膜脂质过氧化反应导致肝细胞损伤[2]。本研究表明,摄入酒精后小鼠血清与肝组织中的SOD与肝GSH-Px明显降低。丙二醛(MDA)是脂质过氧化反应的终产物,能反映组织中自由基的含量和自由基引发的脂质过氧化程度[2]。本实验中模型对照组小鼠较正常对照组血清与肝组织中MDA含量有显著性增加。故可以认为该急性酒精性肝损伤模型的制备是成功的。
　　据《中国药典》中记载:石斛,性寒,味甘、淡、微咸,入胃、肾经,具有益胃生津,滋阴清热的功效。入胃经从而使胃津充足,受纳腐熟水谷,化生为血液,以滋养肝体。入肾经,滋补肾阴,充足肾精,精生血,滋补肝阴,从而纠正偏亢的肝阳,使肝之疏泄功能恢复正常[1],从而可能减少自由基的生成。本研究结果显示,鲜铁皮石斛(3g/kg)与铁皮枫斗(0.45g/kg、0.90g/kg、1.35g/kg)均能升高血清和肝SOD、肝GSH-Px,鲜铁皮石斛(6g/kg)能升高血清SOD、肝GSH-Px;鲜铁皮石斛(3g/kg、6g/kg)与铁皮枫斗(0.45g/kg、0.90g/kg)均能降低血清和肝MDA,鲜铁皮石斛(9g/kg)能降低血清MDA。因此,铁皮石斛和铁皮枫斗对急性酒精性肝损伤模型小鼠具有抗氧化作用。
　　
　　4 参考文献
　　[1]印会河,童瑶.中医基础理论[M].第2版.北京:人民卫生出版社,2007:135-135.
　　[2]刘协,顾呈华,胡启之,等.甘草甜素脂质体对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用[J].中国临床康复,2004,3(86):8260-8261.
　　收稿日期 2010-02-25

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