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烯效唑对罂粟抗氧化酶活性及可溶性糖含量的影响研究

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  摘要以罂粟为材料,研究不同浓度烯效唑对罂粟抗氧化酶以及可溶性糖含量的影响。结果表明:高浓度烯效唑处理对抗氧化酶各项指标的影响显著地高于低浓度处理;烯效唑处理后罂粟的可溶性糖含量随处理时间延长和处理浓度的升高而增加。
  关键词罂粟;烯效唑;抗氧化酶;可溶性糖含量;影响研究
  中图分类号 S567.212 文献标识码A文章编号 1007-5739(2010)16-0050-03
  
  EffectResearchofUniconazoleonSolubleSugarContentandAntioxidantEnzymeActivityinOpiumPoppy
  ZHAO RuiGUO Ping-Yi *YUAN Xiang-YangGUO XiuWANG WeiCHEN Hong-Bin
  (Agriculture College,Shanxi Agricultural University,Taigu Shanxi 030801)
  AbstractTaking opium poppy as material,effect of the different density of aniconazole on opium poppy antioxidant enzyme system and soluble sugar content were studied. The results indicated that high concentration uniconazole had significant influence on antioxidant enzyme indexes than those of low concentration. The content of soluble sugar which deal with low concentration of uniconazole increased as the time and concentration kept up under the treatment.
  Key wordopium poppy;uniconazole;antioxidant enzyme;soluble sugar content;effect research
  
  罂粟具有很高的药用价值和观赏价值,可以形成可观的产业及相应的经济价值。但是,罂粟又是提取毒品海洛因的主要毒品原植物,长期食用容易成瘾,严重危害身体。当今世界毒品泛滥对人类社会的危害日趋严重,已成为一个全球性的社会问题。因利益驱使使罂粟的非法种植现象在一些地区有不同程度的存在。毒品对社会的巨大危害,因此,对非法种植罂粟的防除显得尤为重要和迫切[1]。
  利用植物生长调节剂,可以使植株在营养生长阶段积累的大量营养物质主要用于加粗主茎,分化腋芽为莲座状叶丛,由生殖生长退回到营养生长或不经历生殖生长[2-4],形成生育逆转。由于提取毒品的材料是罂粟的果实,所以利用植物生长抑制剂或延缓剂对罂粟的抽薹逆转或抑制,使其不能正常生长、结实,能从根本上起到阻碍罂粟生长的作用[1]。
  选用高效、低毒的植物生长延缓剂烯效唑(S3307),可抑制植株顶端分生区细胞的伸长,使植物节间缩短,植物矮化,对草本或木本的单、双子叶植物均有强烈的生长抑制作用。该文在罂粟拔节前(苗期)喷施不同浓度的烯效唑,测定其对罂粟叶片中抗氧化酶活性以及可溶性糖含量的影响,旨在探明不同浓度烯效唑处理与罂粟抗氧化酶活性及可溶性糖含量的关系,为利用烯效唑防除毒品原植物罂粟提供理论依据。
  1材料与方法
  1.1试验地概况
  大田试验于2008年4―8月在山西农业大学农作站网室内进行。试验地位于山西省晋中腹地,海拔约为792 m,属于温带大陆性季风气候;春季多风,夏季炎热,秋季凉爽,冬季寒冷干燥,一年中四季分明,昼夜温差大。年平均温度在9 ℃左右,1月平均温度在7 ℃左右,7月均温23 ℃左右。年降水量约540 mm,无霜期为140~180 d。试验土壤为黄土状母质上发育的碳酸盐褐土,0~20 cm土层有机质含量1.74%,全氮6.36 g/kg,速效磷6.69 mg/kg,速效钾185.2 mg/kg,试验地基本概况符合试验要求。
  1.2试验材料
  罂粟种植资源,山西省公安厅禁毒总队提供;烯效唑5%可湿性粉剂,江苏盐城利民农化有限公司生产。
  1.3试验设计
  试验设4个烯效唑浓度处理:200、400、800、1 600 mg/L,以清水作对照(CK)。每处理重复3次,小区面积为4 m2,区间间隔1 m。在罂粟苗期(拔节前)使用不同浓度的烯效唑对植株进行茎叶喷施。每小区喷药300 mL。播前土壤施复合肥(N∶P∶K=10∶4∶6,腐殖酸为25%)1 200 kg/hm2。
  1.4试验方法
  1.4.1粗酶液制备。参照李合生的方法[5],称取0.1 g鲜重罂粟叶片,置于预冷研钵中,加入1.5 mL 0.1 mL/L磷酸缓冲液(pH值7.8)于冰浴上研磨,4 ℃下10 000 r/min冷冻离心15 min,取上清液供酶活测定。
  1.4.2酶活性的测定。①超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定。采用氮蓝四唑(NBT)光化还原法。取50 μL酶提取液,依次加入1.5 mL 0.05 mol/L磷酸缓冲液(pH值7.0)、0.3 mL 130 nmol/L Met、0.3 mL 750 μmol/L NBT、0.3 mL 100 μmol/L EDTA-Na、0.3 mL 20 μmol/L核黄素、0.5 mL蒸馏水,在28 ℃ 10 000 lx光照下强度反应1 h,测定560 nm处的光密度。以抑制NBT光化还原50%作为1个酶单位。②过氧化物酶(POD)活性的测定。采用愈创木酚显色法。取100 μL酶提取液,加入3 mL 0.1 mol/L磷酸缓冲液(pH值7.8)、15 μL愈创木酚、30 μL 30% H2O2,于37 ℃下平衡20 min后测定470 nm处的光密度。③过氧化氢酶(CAT)活性测定。采用紫外吸收法测定。取50 μL酶提取液,加入2 mL 0.1 mol/L磷酸缓冲液(pH值7.8),在25 ℃水浴中平衡5 min,然后加入1 mL 0.08% H2O2开始记时,3 min后测定240 nm处的光密度值,每1 min测1次,共测3次,以每分钟吸光度变化0.01为1个酶活性单位。
  1.4.3可溶性糖含量的测定。准确称取罂粟叶片0.1 g置于研钵,加入5 mL 0.1%三氯乙酸(分2次加入)和少量石英砂,研磨成匀浆,再转移到试管中,加入5 mL 0.5%硫代巴比妥酸溶液,摇匀;将试管放入沸水浴中显色反应15 min,然后取出并放入冰浴中冷却至室温;待试管冷却后,转入10 mL离心管中,4 000 r/min离心15 min,取上清液并测量其体积,以0.5%硫代巴比妥酸溶液作为参比,测400 nm的吸光值。

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