3种药用蕨类植物水提取液抗菌性研究

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　　摘要:以内江市3种重要的野生药用蕨类植物凤尾蕨(Pteris multifida)、肾蕨(Nephriosorus auriculata)和贯众(Cyrtomium fortunei)的水提取液为试验材料,采用纸片扩散法测定其对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌和浓杆菌的抑菌活性效果。结果表明,不同部位对不同的菌种的抑菌效果不同,其中,对大肠杆菌的抑菌活性效果最强,对金黄色葡萄球菌的抑菌效果次之,对浓杆菌的抑菌效果最小。
　　关键词:药用蕨类;水提液;抑菌效果
　　中图分类号Q949.36文献标识码A文章编号 1007-5739(2010)11-0023-01
　　
　　StduyontheInhibitoryEffectofWaterExtractsfromThreeSpeciesofMedicinalPteridophytes
　　TAO Guang-song1CUI Sheng-bin 1JIANG Jian-hui 1ZHUO Zhi-yuan 1DENG Yang-yang 1ZHANG Xuan-bo 2 *
　　(1Department of Biology,Neijiang Normal University,Neijiang Sichuan 641112; 2 Key Laboratory of Colleges and Universities for Research and Utilization of Distinctive Agricultural Undertakings,Neijiang Normal Univercity)
　　AbstractThe water extracts of Pteris multifida,Nephriosorus auriculata and Cyrtomium fortunei in Neijiang were used to study the inhibitory effect on Staphs lococcus,Escherichia coli,Bacillus subtilis and Pseudomonas aeruginosa.The results showed that the different part of medicinal pteridophytes had different inhibitory effect. The bacteriostatic activity of pteidophyte against Escherichia coli was the highest,Staphs lococcus was the second and Pseudomonas aeruginosa was the lowest.
　　Key wordsmedicinal pteridophytes;water extract;inhibition effect
　　
　　蕨类植物也称羊齿植物,在植物分类学中被列为蕨类植物门。四川现有蕨类植物730多种,仅次于云南省,居全国第2位[1]。很多蕨类植物具有药用功效,我国劳动人民很早就用蕨类植物来治病。到目前为止,作为药用的蕨类植物至少有100多种。根据相关文献研究报道,至少有50种以上的蕨类植物具有一定的抗菌性、抑菌性[2-6]。目前,对于蕨类植物的抗菌性、抑菌性试验已经成为蕨类植物研究热点领域之一。考虑中药材的药性存在地域上差异性,且根据报道资料显示抗菌性试验研究基本采用全草试验,无法比较各部位的抗菌性差异。本文选取内江市3种重要的野生药用蕨类植物凤尾蕨(Pteris multifida)、肾蕨(Nephriosorus auri-culata)和贯众(Cyrtomium fortunei)作为试验材料,对其不同部位进行抗菌性试验,以此为药用蕨类植物资源的开发利用提供参考。
　　1材料与方法
　　1.1试验材料
　　3种药用蕨类样品采于内江市郊区,采回后用蒸馏水洗净、晾干,然后在80 ℃烘干,再用粉碎机将其粉碎后用保鲜袋装好,备用。供试菌种:金黄色葡萄球菌(Staphs lococcus)、大肠杆菌(Escherichia coli)、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、浓杆菌(Pseudomonas aeruginosa),均由内江师范学院微生物实验室提供。牛肉膏蛋白胨培养基(牛肉膏3 g,蛋白胨10 g,NaCl 5 g,琼脂15 g,葡萄糖5 g,水1 000 mL,pH值7.2)。
　　1.2试验方法
　　1.2.1菌悬液制备。将试验用菌在斜面上活化,然后将活化的菌种接种于液体培养基,置于恒温培养箱中,37 ℃培养20 h,最后制成含菌数约108个/mL菌悬液。
　　1.2.2水提液的制备。称取10 g样品置于烧杯中,加蒸馏水200 mL,浸泡4 h后,用文火煮30 min,过滤,得上清液,残渣再加100 mL蒸馏水煮20 min,合并上清液加热浓缩至10 mL,使其保持浓度为1 g/mL,将浓缩的水提液用高压蒸汽灭菌锅在120 ℃条件下灭菌15 min,备用。
　　1.2.3培养基的制备。将配制好的培养基放在121 ℃条件下灭菌20 min,然后将其倒入培养皿中制成平板,冷却,备用。
　　1.2.4抗菌性的测定。将滤纸片灭菌后分别在水提液中浸泡30 min,用移液枪吸取菌悬液滴入已灭菌并凝固的细菌培养基平板上,用无菌涂棒涂抹均匀,再将泡过水提液的圆滤纸片分别放入有不同细菌的培养皿中,每个培养基放3个纸片。37 ℃下培养24 h后测定抑菌圈直径,同步用无菌蒸馏水浸泡过的圆滤纸片作为对照。重复测定3次,结果取平均值。
　　2结果与分析
　　3种药用蕨类植物水提液的抑菌试验结果见表1。
　　由表1可知,肾蕨叶的水提取液对金黄色葡萄球菌的抑菌活性最强,抑菌圈直径为本次试验最大值15.3 mm,贯众叶、凤尾蕨根对浓杆菌的抗菌性最弱,抑菌圈直径都只有9.8 mm,最大直径与最小直径差距为5.5 mm,这说明3种蕨类植物各部位的抗菌性存在明显差异。但总体来看,内江市郊区3种药用蕨类植物的水提取液对4种供试菌均表现出较强抑菌活性。说明3种蕨类植物体内均有抗菌物质存在,具有可能开发成为抗菌药物新兴资源。
　　从蕨类植物整体来看,肾蕨全草对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的平均抑菌圈直径均为13.0 mm左右,说明肾蕨全草对三者的抗菌性最显著。从3种蕨类植物的各形态部位表现效果来看,凤尾蕨根的水提取液对4种供试菌的抑菌活性最弱,平均抑菌圈直径只有10.8 mm。肾蕨根的水提取液对4种供试菌的抑菌活性最强,平均抑菌圈直径为13.2 mm。肾蕨各部分水提取液对4种供试菌的抑菌活性差异显著,平均抑菌圈直径最大值与最小值的差距为2.4 mm,其余2种蕨类均低于这个值。
　　从4种供试菌的抑菌敏感度来看,大肠杆菌和金黄色葡萄球菌对3种蕨类植物水提取液的抑菌敏感度较强,平均抑菌圈直径为12.3 mm,其次为枯草芽孢杆菌,平均抑菌圈直径为12.1 mm,而浓杆菌对3种蕨类植物抑菌敏感度较弱,平均抑菌圈直径仅为10.4 mm。
　　3讨论
　　本试验中4种供试菌均为细菌,未选用真菌作为供试菌,不能得出3种蕨类的水提取液对细菌和真菌的抑制效果孰高孰低,但蔡建秀等[4]对20种药用蕨类植物提取液抑菌试验研究表明,细菌的敏感度总体来说较真菌的高。此外,本试验只采用了水提取液法,未采用醇提取液法进行对比,有关资料表明[7],在大多数情况下,醇提取液法效果优于水提取液法,因此以后还可对本试验进行更深入地研究。
　　4致谢
　　本试验在内江师范学院微生物实验室进行,得到黎勇老师及该实验室成员的支持,在此一并致谢。
　　5参考文献
　　[1] 孔宪需.四川植物志:第6卷[M].成都:四川科学技术出版社,1988:1-4.
　　[2] 古丽斯玛依・艾拜都拉,苏力坦・阿巴白克力,阿斯热古丽.3种天山蕨类植物体外抑菌活性研究[J].地方病通报,2005,20(3):4-6.
　　[3] 庄惠如,吴文珊,卢海声.福建福州25种蕨类植物抑菌活性筛选研究[J].亚热带植物通讯,2000,29(1):5-8.
　　[4] 蔡建秀,吴文杰,葛清秀.20种药用蕨类植物提取液抑菌试验研究[J].亚热带植物科学,2004,33(1):22-25.
　　[5] 许柑叶,郑怡,陈晓清.8种蕨类植物多糖提取物抑菌效果的研究[J].福建师范大学学报:自然科学版,2005,21(2):99-102.
　　[6] 谭远友,向育民.铁线蕨根茎醇提取物对耐利福平结核杆菌的影响[J].武汉科技学院学报,2003,16(3):79-83.
　　[7] 宋磊,姜德全,李新国.四种野生蕨类植物抑菌作用分析[J].天然产物研究与开发,2007(19):76-78.

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