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畲药铜丝藤植物根和根状茎部位对实验性糖尿病小鼠的降血糖作用研究

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  [摘要] 目的 探讨畲药铜丝藤植物根以及根状茎部位表现出的降血糖作用。 方法 观察畲药铜丝藤植物根以及根状茎部位提取液对正常小鼠血糖的影响,利用NS针对四氧嘧啶构建糖尿病小鼠模型,对入选小鼠进行分组,分别设为模型组、水提液组[100、200、300 mg/(kg·d)]以及降糖灵组。1次/d的灌胃频率,时间为2周。在第15天,利用葡萄糖氧化酶法对患者的空腹血糖水平进行检测;取构建成功的高血糖小鼠模型,按照随机数字法则分为五组,模型组,药物治疗组(降糖灵组)作为阳性对照,水提液组[100、200、300 mg/(kg·d)],给药3 h后给予2.5 g/kg葡萄糖进行灌胃,在0 h、1 h、2 h及3 h時采用罗氏优越血糖监测仪检测血糖。 结果 给予正常的小鼠灌胃药物后,各个时间点血糖值和对照组无明显差别,组间比较无统计学意义(P>0.05);用药前,五组血糖对比,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后降糖灵组和提取液组血糖水平均显著下降(P<0.05),且与模型对照组相比,降糖灵组和水提取液(高、中以及低剂量组)差异具有统计学意义(P<0.05);水提液(高、中、低剂量组)主要是在1 h和2 h对血糖升高有抑制作用(P<0.05),且随剂量增多,降糖效果就越明显。 结论 畲药铜丝藤跟以及根状茎水提液能够显著降血糖且不影响正常小鼠的血糖。
  [关键词] 畲药铜丝藤植物根;根状茎;降血糖;降糖灵
  [中图分类号] R291          [文献标识码] A          [文章编号] 1673-9701(2019)05-0034-03
  [Abstract] Objective To investigate the hypoglycemic effect of the plant roots and rhizomes of the peony root. Methods The effects of extracts from the roots and rhizomes of the peony roots on the blood glucose of normal mice were observed. The diabetic mice model was constructed by NS against alloxan,and the selected mice were grouped into the model group, the aqueous extract group[100, 200, 300 mg/(kg·d)] and the hypoglycemic group, with the frequency of gavage once a day, and the time was 2 weeks.On the 15th day,the fasting blood glucose level of the patients was detected by glucose oxidase method. The successfully constructed hyperglycemic mouse models were divided into five groups according to the random number rule, including the model group and the drug treatment group(the phenformin group) as the positive control, the water extract group[100, 200, 300 mg/(kg·d)]. The 2.5 g/kg glucose was gavaged at 3 hours after administration. And the blood glucose was measured by Roche superior blood glucose monitor at 0 h, 1 h, 2 h and 3 h. Results After intragastric administration of normal mice, there was no significant difference in the blood glucose levels at each time point compared with that of the control group. There was no significant difference between the two groups(P>0.05). Before the treatment, the blood glucose levels of the five groups were not statistically significant(P>0.05). After treatment, the blood glucose level of the Jiangtangling group and the extract group decreased significantly(P<0.05), and compared with the model control group, the difference between the phenformin group and the water extract(high, medium and low dose groups) was statistically significant(P<0.05). And there was significant difference between the phenformin group, the water extract (high, medium and low dose groups) and the model control group(P<0.05). The water extract (high, medium and low dose groups) mainly inhibited the increase of blood glucose at 1h and 2 h(P<0.05), and the effect of hypoglycemia was more obvious with increasing dose. Conclusion The water extract of the phyllostachys pubescens plant root and rhizome can significantly reduce blood sugar and does not affect the blood sugar of normal mice.   [Key words] Phyllostachys pubescens plant root; Rhizome; Hypoglycemic; Phenformin
  糖尿病作为代谢紊乱性疾病中之一,严重威胁着人类的健康,其发病率和致残率极高,近年来,其发病概率呈现出升高趋势,且随着老龄化的加剧,趋势更加明显[1-2],近年来,中草药降糖效果获得广泛关注[3]。畲药铜丝藤其味甘淡,性寒,具有清热解毒、利湿利胆消肿的功效,常用来治疗尿路结石、泌尿感染等[4]。有文献报道称[5]其主要成分为黄酮、酚酸以及脂肪类物质,其药效成分复杂,近期有学者[6]发现其具有将血糖的功效,但是够对所有的糖尿病均有效,尚未见有相关报道,因此本次研究主要是通过小鼠实验来观察其降糖的作用,以期为后续临床应用提供数据支持。
  1 资料与方法
  1.1 动物和试剂
  选择昆明种小鼠,雌雄各占1/2,体重21~23 g。四氧嘧啶采购自北京百奥莱博科技有限公司。氯仿、葡萄糖等试剂采购自北京澳博星生物科技有限公司。
  1.2 畲药铜丝藤植物根和根状茎部位提取液制备
  取畲药铜丝藤植物根和根尖茎部100 g,粉碎,过80亩筛,按照10:1(料液比)加入40℃水,搅拌浸提,浸提2遍,合并抽滤,真空减压浓缩至原体积的1/4,即为水提取液。
  1.3 治疗方法
  1.3.1 正常小鼠灌胃畲药铜丝藤植物根和根尖茎部提取液的试验观察  随机选取健康小鼠50只,按照随机数字法则分为对照组(给予等量的生理盐水)、降糖灵组[120 mg/(kg·d)],以及提取液组[100、200、300 mg/(kg·d)],每天灌一次,连续2周,分别于0 d、4 d、8 d和14 d眼眶取血,测定血糖水平。
  1.3.2 对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠的降糖效果  利用NS针对四氧嘧啶进行配置,确保剂量为0.02 g/mL。之后于小鼠腹腔中注射,控制注射剂量为200 mg/kg;之后利用2 g/kg葡萄糖对小鼠进行灌胃操作,时间为2 d,频率为2次/d,分别于早晚进行。之后针对空腹血糖利用葡糖糖氧化酶法进行检测,如果最终水平在11 mmol/L以上,则证明小鼠造模成功。
  完成后,对入选小鼠展开分组后,分别设为模型组、水提液组[100、200、300 mg/(kg·d)]以及降糖灵组。1次/d的灌胃频率,时间为2周。在第15天,利用葡萄糖氧化酶法对患者的空腹血糖水平进行检测[7-8]。
  1.3.3 高血糖小鼠糖耐量试验  取构建成功的高血糖小鼠模型,按照随机数字法则分为五组,模型组,药物治疗组(降糖灵组)作为阳性对照,水提液组[100、200、300 mg/(kg·d)],按照1.3.2方法进行给药,连续给药2周,末次给药后禁食不禁水12 h,给药3 h后给予2.5 g/kg葡萄糖进行灌胃,在0 h、1 h、2 h以及3 h时采用罗氏优越血糖监测仪检测血糖。
  1.4 统计学方法
  采用统计学软件SPSS20.0对所有研究对象检测结果展开统计学分析,计量资料(血糖水平)组间比较通过t检验,以(x±s)形式表示,P<0.05为差异具有统计学意义。
  2 结果
  2.1 畲药铜丝藤植物根和根尖茎部提取液对正常小鼠血糖的影响
  2.2 畲药铜丝藤植物根和根尖茎部提取液对糖尿病小鼠模型的影响
  用药前五组血糖对比,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后降糖灵组和提取液组血糖水平均显著下降(P<0.05),且与模型对照组相比,降糖灵组和水提取液(高、中以及低剂量组)差异具有统计学意义(P<0.05)。说明畲药铜丝藤跟以及根状茎提取液具有明显降血糖作用,且随着浓度的增加,其降糖作用就更加明显。见表2。
  2.3 畲药铜丝藤植物根和根尖茎部提取液对高血糖小鼠糖耐量的影响
  3 讨论
  糖尿病作为一种代谢性疾病,严重威胁着人类的健康,其发病率和致残率极高,该疾病特征主要体现为高血糖现象,近年来,发病的概率呈递增趋势,高血糖疾病诱因主要为患者呈胰岛素分泌缺陷的现象或者呈生物作用受损的现象导致,或者因为两种因素共同作用导致[9-12]。在糖尿病阶段,因为长时间血糖水平较高的影响,使得系列组织等呈功能障碍以及慢性损害的现象[13-15]。目前临床上多采用注射胰岛素或口服磺酰脲類和双胍类降糖药物,以期达到降血糖的目的。但有报道称[16]西药尽管见效快,但其毒副作用较强,并且常常会形成胰岛素依赖性,因此开发无毒副作用的药物势在必行。
  近年来,中草药降糖效果获得广泛关注,民间利用根状茎以及根部泡茶,分析在降血糖方面可以获得一定效果,本次研究将此作为实验目标展开实验研究,以证实二者的应用价值,并且为高血糖患者血糖水平的降低做出充分保证[17-19]。刘宏杰等[20]采用绿茶、红茶、乌龙茶及黑茶观察其在小鼠中的降糖效果,结果显示绿茶具有降糖功效,且呈剂量关系。畲药铜丝藤其味甘淡,性寒,具有清热解毒、利湿利胆消肿的功效,常用来治疗尿路结石、泌尿感染等,但其在降血糖中的应用尚未见有报道,本研究选取畲药铜丝藤跟及根状茎水提液作为研究对象,结果显示,给予正常的小鼠灌胃药物后,各个时间点血糖值和对照组无明显差别,组间比较差异无统计学意义(P>0.05),说明畲药铜丝藤植物根和根尖茎部提取液不会对正常小鼠的血糖值产生影响。用药前,五组血糖对比,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后降糖灵组和提取液组血糖水平均显著下降(P<0.05),且与模型对照组相比,降糖灵组和水提取液(高、中以及低剂量组)差异具有统计学意义(P<0.05),说明畲药铜丝藤跟及根状茎提取液具有明显降血糖作用,且随着浓度的增加,其降糖作用更加明显。水提液(高、中、低剂量组)主要是在1 h和2 h对血糖升高有抑制作用(P<0.05),且随剂量增多,降糖效果就越明显,说明畲药铜丝藤植物根和根尖茎部提取液能达到与市面药物一样的效果。   经过本次研究发现,畲药铜丝藤跟及根状茎水提液,在降血糖方面可以获得一定效果,但是针对其具体的降血糖机制及降血糖物质基础需要进行进一步研究,从而证明民间采用根状茎以及根部泡茶的方法,对于高血糖疾病可以进行有效预防以及治疗,使得血糖水平获得一定程度改善。
  
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  (收稿日期:2018-08-09)
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