您好, 访客   登录/注册

DNA倍体定量分析在宫颈上皮内病变的准确性研究

来源:用户上传      作者:

  [摘要] 目的 探讨DNA倍体定量分析在宫颈上皮内病变的初步筛查中的准确性。 方法 方便收集该院2017年1—12月期间同时进行DNA倍体定量分析且发现异倍体细胞的和阴道镜活检并有明确病理诊断的宫颈上皮内病变的病例800例,分析DNA倍体定量分析的准确性,与阴道镜活检的组织病理诊断相比,评价DNA倍体定量检测作为宫颈上皮内病变的初步筛查手段的准确性。 结果 异倍体细胞为1~2个有564例,其DNA倍体定量分析病例与活检病理诊断的符合率为84.22%(475/564);异倍体细胞≥3个的有236例,其DNA倍体定量分析病例与活检病理诊断的符合率为90.25%(213/236)。 結论 DNA倍体定量分析有较高的准确性,是宫颈上皮内病变的初步筛查的一个重要手段。
  [关键词] 宫颈上皮内病变;DNA倍体定量分析;宫颈癌
  [中图分类号] R711.74;R737.33          [文献标识码] A          [文章编号] 1674-0742(2019)02(a)-0038-03
  [Abstract] Objective To investigate the accuracy of DNA ploidy analysis in the initial screening of cervical intraepithelial lesions. Methods A total of 800 cases of cervical intraepithelial lesions with abundance of ploidy and colposcopic biopsy and clear pathological diagnosis were convenient collected from January to December 2017. The accuracy of quantitative analysis was compared with the histopathological diagnosis of colposcopy biopsy to evaluate the accuracy of DNA ploidy as a primary screening method for cervical intraepithelial lesions. Results There were 564 cases of aneuploid cells in 1-2 cases. The coincidence rate of DNA ploidy analysis and biopsy pathological diagnosis was 84.22% (475/564); 236 cases of aneuploid cells ≥3 cases and the coincidence rate between DNA ploidy quantitative analysis and biopsy pathological diagnosis was 90.25% (213/236). Conclusion The quantitative analysis of DNA ploidy has high accuracy and is an important means for the initial screening of cervical intraepithelial lesions.
  [Key words] Cervical intraepithelial lesion; Quantitative analysis of DNA ploidy; Cervical cancer
  宫颈癌是女性生殖系统中常见的恶性肿瘤之一,威胁着女性的身心健康。第四版宫颈癌诊断与治疗指南指出,宫颈癌的发病率在女性恶性肿瘤中占第二位[1],在西方发达国家,因为国家的初步筛查,其发病率已在缓慢下降,而我国女性,特别是农村女性因经济原因和对宫颈上皮病变疾病的预防意识不足,以及部分青少年女性的早熟和自我保护意识欠缺,发病率和死亡率还在上升[2]。宫颈癌的发病病因尚以明确[3],因此可以通过早期筛查,早发现,早治疗来降低发病率和死亡率,DNA倍体定量分析技术是宫颈癌及宫颈癌前病变筛查比较经济、简便、可靠的方法,有研究结果显示[4],宫颈脱落细胞的DNA倍体定量分析对检测宫颈上皮内病变有较高的敏感性及特异性,该文方便收集该院2017年1—12月期间同时进行DNA倍体定量分析且发现异倍体细胞的和阴道镜活检并有明确病理诊断的宫颈上皮内病变的病例800例,就DNA倍体定量分析在宫颈上皮内病变的初步筛查中的准确性进行探讨,与阴道镜活检病理诊断结果相比较,评价DNA倍体定量分析技术作为宫颈癌及宫颈癌前病变的初步筛查手段的意义。
  1  资料与方法
  1.1  一般资料
  方便收集云南省曲靖市第一人民医院病理科妇科送检DNA倍体定量分析及同时进行阴道镜活检且均为DNA倍体定量分析发现异倍体细胞的800例,年龄22~68岁,平均年龄45岁。且所有患者未曾用过任何药物治疗、避开月经期、不过性生活、不冲洗、无怀孕。
  1.2  标本的采集、DNA倍体的制片及分析
  妇科医生用阴道扩张器扩开阴道,肉眼直视下将宫颈刷插入宫颈管内在子宫颈黏膜面顺时针旋转3至5圈后脱掉刷头,将刷头放入妇科专用的细胞保存液中,拧紧细胞保存液瓶盖并贴上带有患者名字的标签送至病理科,由病理科技术员核对患者信息、接收标本并制片,首先将样本保存瓶在振荡器上震荡5~10 s混匀,用吸管吸取8 mL样本,加入事先准备好的细胞分离液的上层,1100转离心2 min,弃上清液,后2 200 r离心5 min,弃上清液,视沉淀大小,用洗瓶向每个离心管中加入1~2 mL缓冲液,在振荡器上震荡混匀10~20 s,以完成细胞的沉淀及混匀,然后将沉降仓和预处理载玻片在制片版上固定好,水平放置;用吸管转移0.5~1 mL细胞悬液至沉降仓中,静置10 min来完成样本的沉降,然后在冲洗、固定、由公司配置好的成品染液进行伊红染色后晾干及封片;片子制备完成后采用全自动细胞 DNA 定量分析系统(麦克奥迪医疗诊断系统有限公司)对所有的DNA染色玻片进行扫描,每张玻片扫描细胞核数的最低值为5 000个,最高值为12 000个,判定此玻片为合格,全自动细胞 DNA 定量分析系统根据不同细胞核所具有的不同特征参数自动完成细胞分类和计数。   1.3  DNA倍体定量分析结果判定标准及临床建议
  异倍体细胞≥3个、DNA指数(DI)>2.5 的异倍体细胞或者细胞增殖比例大于细胞总数的10%,建议阴道镜检查或活检;异倍体细胞为1~2个、DNA 指数(DI)>2.5的异倍体细胞或者细胞增殖比例在5%~10% 之间,建议4~6个月复查;无异倍体细胞则可定期进行正常筛查。
  1.4  阴道镜活检标本的制片及组织病理诊断
  阴道镜医生在阴道镜下病变处进行4个点的标本采集、95%的酒精或10%的中性福尔马林固定后送至病理科,由病理科工作人员取材、脱水、包埋、切片、染色及封片。然后由两名副主任医师做病理诊断。宫颈组织病理诊断分为慢性宫颈炎、CINI级(异型细胞局限于上皮的下1/3)、CINII级(异型细胞累及上皮层的下1/3至2/3)、CINIII级(增生的异型细胞超过全层的2/3但还未累及上皮全层)、原位癌(异型增生的细胞累及子宫颈黏膜上皮全层,但病变局限于上皮层内,未突破基膜)和浸润癌。
  1.5  统计方法
  采用SPSS 19.0统计学软件进行数据分析,以阴道镜活检组织的病理诊断为标准,计算DNA倍体定量分析的病例与阴道镜组织活检病理诊断的符合率。
  2  结果DNA倍体定量分析的准确性
  异倍体细胞为1~2 个有564例,其中活检病理诊断为慢性宫颈炎的为89例,CINI级的为376例,CINII级的为56例,CINIII级的为43例,发现宫颈上皮病变的总数为475例,其DNA倍体定量分析病例与活检病理诊断的符合率为84.22%(475/564);异倍体细胞≥3 个的有236例,其中活检病理诊断为慢性宫颈炎的有8例,CINI级的有72例,CINII级的有70例,CINIII级或原位癌的有63例,发现宫颈上皮病变的总数为213例,其DNA倍体定量分析病例与活检病理诊断的符合率为90.25%(213/236)。
  3  讨论
  目前早期筛查方法有巴氏涂片法,此方法敏感性及特异性较低,容易漏诊和误诊;液基细胞学检查方法因其取材和制片方法的改进,可以降低漏诊率和误诊率,即对宫颈癌及癌前病变的筛查提高了准确率;HPV检测筛查,主要通过分子生物学技术完成,HPV感染分中-低危險性(导致低级别宫颈鳞状上皮内病变)和高危险型(导致高级别宫颈鳞状上皮内病变、宫颈原位癌及浸润癌);DNA倍体定量分析技术以通过测量细胞核内DNA含量的变化,在大体形态改变尚不明显前既可检测出病变细胞,对宫颈癌及癌前病变做出早期诊断;癌症属于染色体疾病,致癌物质和错误的有丝分裂可以产生异倍体而引发肿瘤的发生,异倍体引起数以千计的基因和他们编码的蛋白失衡,肿瘤病理学研究显示[5],细胞癌变时,其细胞核内的DNA结构和含量均会发生改变,DNA含量增多或出现DNA倍体异常细胞。而有研究显示[6]宫颈癌是感染疾病,是可预防的疾病,是目前世界上唯一的在早期发现可以治愈的癌症,大多浸润性宫颈癌均有染色体异常改变,DNA异倍体的出现是染色体异常的表现,同时也是一种细胞癌变的特征指标,在CINⅡ、CINⅢ、CIS(原位癌)和浸润癌病例中分别有59%、84%和87%有异倍体细胞出现;DNA 是细胞生长、分化、繁殖的基础。每一个体细胞具有46条染色体,可配成 23 对,称为二倍体,在生理状态下,人体绝大多数的细胞处于静止期,DNA含量固定不变,其DNA指数为1(DI=1),当细胞发生癌变时,细胞生长繁殖、染色体复制、加倍导致基因发生丢失、重组、融合、扩增等变化,使得细胞核内DNA 结构和含量也发生改变为非整倍体细胞。在癌变过程中,先有DNA结构和含量改变,后有细胞形态学改变,当DI≥2.5时,提示细胞恶变的可能。因此,通过分析细胞核内DNA含量的变化,测定被检测细胞 DNA 水平,发现异常DNA 水平细胞,判断细胞的生理状态和病理改变,在形态改变不明显前既可检测出那些病变细胞,实现癌及癌前病变的早期诊断,而且DNA倍体定量分析对宫颈上皮内病变检查具有简便、经济、可靠和减少漏诊率的优点,较常规细胞学方法在宫颈癌的早期发现及诊断方面更有优势,有研究表明[7],宫颈癌的I期治愈率≥90%,0期治愈率为100%,然而,从异倍体早期发展成恶性肿瘤是一个漫长的过程,因此早期筛查显得尤为重要,宫颈癌的早期筛查与早期治疗是治愈宫颈癌的主要手段,而DNA定量分析技术是宫颈癌早期筛查的重要手段。
  该研究结果显示,在异倍体细胞为1~2 个的564例中,其DNA倍体定量分析结果与活检病理诊断结果的符合率为84.22%(475/564);在异倍体细胞≥3 个的236例中,其DNA倍体定量分析结果与活检病理诊断结果的符合率为90.25%(213/236),此结果说明DNA倍体定量分析结果与活检病理结果有较高的符合率,其准确性比较可靠,可以作为宫颈上皮内病变的早期较可靠的筛查方法;该研究结果比某些文献报道的结果[8]:DNA倍体定量分析结果与活检病理诊断结果的符合率为61.91%要高,此差异可能与标本收集的数量、不同妇科医生的取材标本量、不同病理技术人员的制片及DNA倍体定量分析系统参数的设置参数的多少有关。
   综上所述,DNA倍体定量分析系统具有准确率高、敏感性强、重复性好、简便经济、出结果快及减少漏诊及误诊率的优点,其是一种很好的宫颈癌前病变及早期宫颈癌筛查方法,可作为大规模应用的一种新方法,结合阴道镜检查和病理活检诊断,可以对宫颈癌前病变及宫颈癌做出早期诊断,能有效的指导宫颈癌的临床治疗,对宫颈癌判断预后提供帮助,同时对降低宫颈癌的死亡率具有很大的意义。
  [参考文献]
  [1]  中国抗癌协会妇科肿瘤专业委员会.宫颈癌诊断与治疗指南[J].中国实用妇科与产科杂志,2018,34(6):613-622.
  [2]  王双双,李惠,唐福婷,等.细胞DNA定量分析及高危型HPV-DNA检测在宫颈病变筛查中的应用[J].临床与病理杂志,2017,37(4):791-795.
  [3]  田玉旺,刘光,周建,等.细胞DNA定量分析技术在宫颈癌及癌前病变早期筛查中的应用价值[J].诊断病理学杂志,2013,20(7):425-428.
  [4]  张云清,尹香利,韩慧慧.DNA倍体检测对宫颈癌病灶中癌细胞增殖、侵袭活性的评估价值研究[J].海南医学院学报,2018,24(7):789-792.
  [5]  钟萍萍,顾依群,王军,等.DNA定量分析在宫颈癌筛查中的应用[J]. 中华病理学杂志, 2013, 42(7): 469-470.
  [6]  Palsdottir K,Epstein E.A Pilot Study on Diagnostic Perfor- mance of Contrast-Enhanced Ultra sonography for Detection of Early Cervical Cancer[J]. Ultrasound Med Biol 2018, 44 (8): 1664-1671.
  [7]  Raspollini MR,Lax SF,McCluggage WG.The central role of the pathologist in the management of patients with cervical cancer:ESGO/ESTRO/ESP guidelines[J].Virchows Arch 2018, 473 (1): 45-54.
  [8]  余翔,吴春霞.液基细胞学检查DNA定量分析在宫颈癌早期筛查中的应用研究及意义[J].湖南师范大学学报:医学版,2017,14(4):142-144.
  (收稿日期:2018-11-07)
转载注明来源:https://www.xzbu.com/6/view-14913671.htm

服务推荐