虾青素对人体抗氧化功能的实验研究

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　　摘  要：目的  研究虾青素对人体抗氧化能力的作用。方法  采用自身对照和组间对照法，选取120例受试者，试食者60例，对照组60例。试食者服用虾青素软胶囊（折合成虾青素9mg/d），连续服用90d，对照者服用安慰剂，试食前后分别检测安全性指标和功效指标。结果  试食前两组间过氧化脂质（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）活力无显著差异，具有可比性;试食组试食前后自身配对比较MDA、GSH-Px、SOD活力差异均具有显著性意义（P<0.01）;试食后试食组与对照组组间比较MDA、GSH-Px、SOD活力差异均具有显著性意义（P<0.05或P<0.01）。结论  该研究表明日服用9mg虾青素能明显提高人体抗氧化功能，且对服用者身体健康无影响，为虾青素的开发应用提供理论基础。
　　关键词：虾青素  抗氧化  过氧化脂质  谷胱甘肽过氧化物酶  超氧化物歧化酶
　　中图分类号：R151    文献标识码：A 文章编号：1672-3791（2020）04（c）-0206-04
　　Abstract： To study the antioxidant ability of Astaxanthin soft capsule. Taking 120 subjects divided into two groups at random with self-control and inter- control methods. The subjects in the test group took Astaxanthin soft capsules （with Astaxanthin 9mg/d）， the other group took placebo. Safety index and efficacy index were detected before and after trial. The activities of lipid peroxide （MDA）， glutathione peroxidase （GSH-Px） and superoxide dismutase （SOD） were not significantly different between the two groups before the trial. There was a significant difference between the test group before and after the trail（P<0.01）. There was also a significant difference between the test group and control group after the trail （P<0.05或P<0.01）. It meant taking 9 mg Astaxanthin/d can significantly improve the body’s antioxidant ability and no side-effects.
　　Key Words： Astaxanthin; Antioxidation; MDA; GSH-Px; SOD
　　蝦青素Astaxanthin又名虾黄素、龙虾壳色素，是一种类胡萝卜素，最早在虾体内被发现，是自然界中最强的抗氧化剂，其抗氧化能力是维生素E的550倍，被称为“超级抗氧化剂”，在食品、医药、日化等领域具有重要作用。虾青素不仅具有很强的抗氧化活性，还是自然界中最有潜力的抗氧化色素[1]，在抗炎[2]、心血管[3]、神经保护[4]等方便具有显著的功效。雨生红球藻是已知生物中虾青素积累量最高的物种[5]，根据卫生部2010年第17号公告，雨生红球藻被批准为新食品原料，正式可用于保健食品中，开启虾青素应用的新大门。
　　虾青素的抗氧化功能评价集中在体外[6-7]和动物试验[8-9]，极少有人体试验。为明确虾青素用量对人体抗氧化能力的影响，该研究采用虾青素软胶囊，联合山东中医药大学第二附属医院按国家食品药品监督管理局（国食药监保化[2012]107号）附件1要求进行人体抗氧试食试验，探索虾青素具体用量达到抗氧化效果，为虾青素相关产品的研制提供理论基础。
　　1  资料与方法
　　1.1 试剂与材料
　　虾青素软胶囊（由康恩贝研究院实验室提供，批号190220，0.5g/粒，每粒含虾青素2.25mg）;安慰剂（由康恩贝研究院实验室提供，批号190220，不含虾青素）。
　　1.2 主要仪器
　　全自动血液分析仪XT-1800i（日本希森美康）;尿液分析仪Uritest-500B（桂林优利特）;全自动生化分析仪7600-110（日立）;X光机XR/D（美国GE）;ECG-1350P（日本光电）;B超PREIRUS（二郎神，日立）;便常规LJ-2000 Olympus CHC 212（日立）。
　　1.3 服用方法
　　120例受试者，随机分为两组，试食者60例，对照组60例，连续服用90d，试食者服用虾青素软胶囊，每日2次，每次2粒;对照组服用同等剂量的安慰剂，连续服用90d。
　　1.4 受试者服用前情况比较
　　试验前对受试者进行心率、血压、血象、大小便、肝肾功能、胸透、心电图、B超等检查。
　　1.5 安全性指标
　　各项指标试验前和试验后分别检测。一般状况：受试者在试食期间的精神、睡眠、饮食、大小便、心率、血压、体重;血、尿、便常规检查;生化指标检查：血清总蛋白、血清白蛋白、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素氮、肌酐、血糖、总胆固醇、甘油三酯;胸透、心电图、腹部B超检查;血液常规检查。 　　1.6 功效性指标
　　过氧化脂质（MDA）含量的变化及下降百分率;超氧化物歧化酶（SOD）的变化及升高百分率;谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的变化及升高百分率。
　　1.7 数据处理
　　自身对照采用配对t检验，两种均数比较采用成组t检验，后者进行方差齐性检验，对非正太分布或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态方差齐后，用转换的数据进行t检验;若转换数据仍不能满足正态方差齐要求，改用t，检验或秩和检验;但变异系数太大（如CV>50%）的资料用秩和检验。在试验前组间比较差异无显著性的前提下，进行试验后组间比较。
　　1.8 抗氧化作用判定
　　各功效观察指标试验前后自身比较和试食后组间比较均有统计学意义，方可判定该指标阳性。过氧化脂质含量、超氧化物岐化酶、谷胱甘肽过氧化物酶三项试验中任二项试验结果阳性，可判定具有抗氧化功能。
　　2  结果
　　2.1 受试者服用前情况比较
　　该研究共纳入120例受试者，受试者服用前情况比较见表1。
　　试食前两组受试者的年龄、性别、MDA含量、SOD、 GSH-Px活力比较，差别均无显著性意义（P>0.05），均衡性较好，具有可比性。
　　2.2 对过氧化脂质（MDA）含量的影响
　　由表2可知，试食组试食前后自身配对比较MDA含量差异具有显著性意义（P<0.01）;对照组试食前后自身配对比较MDA含量差异无显著性意义（P>0.05）;试食后试食组与对照组组间比较MDA含量差异具有显著性意义（P< 0.01）;试食后试食组MDA含量下降百分率（8.52±14.78）%显著高于对照组（-1.05±12.18）%（P<0.01）。过氧化脂质含量试验结果呈阳性。
　　2.3 对谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力的影响
　　由表3可知，试食组试食前后自身配对比较GSH-Px活力差异具有显著性意义（P<0.01）;对照组试食前后自身配对比较GSH-Px活力差异无显著性意义（P>0.05）;试食后试食组与对照组组间比较GSH-Px活力差异具有显著性意义（P<0.05）;试食后试食组GSH-Px活力升高百分率（3.39±6.58）%显著高于对照组0.34±2.71（P<0.01）。谷胱甘肽过氧化物酶试验结果呈阳性。
　　2.4 对超氧化物歧化酶（SOD）活力的影响
　　由表4可知，试食组试食前后自身配对比较SOD活力差异具有显著性意义（P<0.01）;对照组试食前后自身配对比较SOD活力差异无显著性意义（P>0.05）;试食后试食组与对照组组间比较SOD活力差异具有显著性意义（P<0.01）;试食后试食组SOD活力升高百分率（10.26±17.06）%显著高于对照组0.36±2.76（P<0.01）。超氧化物歧化酶试验结果呈阳性。
　　2.5 安全性检查
　　试食后受试者的精神、睡眠、饮食、大小便、心率、血压未见异常。胸透、心电图、腹B超检查（肝、胆、脾、双肾）检查均未见异常。心率、血压、血常规及生化指标见表 。
　　由表5可知，除血压略高于正常值外，虽然与对照组比较，部分指标的差异存在显著性意义（P<0.05或P<0.01），但均在医院正常参考范围内，差异无生物学意义。
　　2.6 尿及便常规
　　受试期间，受试者的尿常规和便常规检查均未见异常改变。
　　3  结语
　　该试验共120例受试者，分为试食组60例，对照组60例，试食组按要求服用虾青素软胶囊，对照组服用安慰剂，90d后获得有效病例120例。试验结果表明，试食前两组间MDA含量、GSH-Px及SOD活力无显著差异，具有可比性;试食组试食前后自身配对比较MDA含量、GSH-Px及SOD活力差異具有显著性意义（P<0.01）;对照组试食前后自身配对比较MDA含量、GSH-Px及SOD活力差异无显著性意义（P>0.05）;试食后试食组与对照组组间比较MDA含量、GSH-Px及SOD活力差异均具有显著性意义（P<0.05或P<0.01）。根据判定原则，以上人体试食结果表明，虾青素软胶囊具有抗氧化的功能。
　　在试食虾青素软胶囊前后，受试者血、尿、大便常规及肝肾功能各项检测指标均在正常范围内。胸透、腹部B超、心电图均未见异常，说明服用虾青素软胶囊对试食者身体健康无不良影响。该试验中虾青素人体服用量为9mg/d，表明在此剂量下虾青素对人体具有抗氧化功能且安全无毒。该试验未设计低中高剂量组，对虾青素的起效最低剂量未进行探索，后续可进行剂量的考察。
　　参考文献
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　　[9] 陈燕，樊柏林，田洁，等.虾青素人参茶叶对老龄小鼠的抗氧化作用[J].公共卫生与预防医学，2016，27（2）：34-37.
　　作者简介：诸晓波（1993，1—），女，汉族，浙江衢州人，硕士研究生，主要从事保健食品及功能性食品开发。
　　 通讯作者：王如伟（1967，12—），男，汉族，浙江杭州人，博士，博士生导师，教授级高级工程师，主要从事中药新药开发工作，E-mail：wangrw@conbagroup.com。
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