酶标板辅助装置的研究现状
来源:用户上传
作者:王可 童晶晶 云悦
摘 要：酶标板是酶联免疫反应试验的一个重要载体工具，主要起到承载被测液体的作用，随着酶标仪功能的研发和推广，酶标板也广泛应用于生命科学研究、化学合成、食品/药品成分分析等领域。但是当酶标板进行多孔、多板、多项目的试验操作时，过程相当繁复且讲究，所以需要有效的配套设备予以辅助。本文概述了目前酶标板辅助装置及配件的研究现状，总结了其在使用操作过程中的突出问题，分析了几项研究所涉及方法和装置的特点及优势，并对其发展予以展望。
关键词：酶标板 辅助装置 酶联免疫吸附试验
随着酶联免疫吸附试验（ELISA）检测技术的广泛应用，如何快速准确地滴加检测样品是提高试验效率的关键步骤[1]。酶标板（ELISA PLATE）作为酶联免疫反应试验的一个重要载体工具，主要起到承载被测液体的作用。对于多个项目、多个版块同时进行的酶联免疫试验是一项劳动密集型工作，操作过程非常繁琐而且容易出错[2]。目前，酶标板的功能开发主要侧重于降低检测过程中各成分之间的相互影响及减少检测物质活性的丧失，也有少数研究报道了为避免因人为操作而引起误差而设计的酶标板辅助装置及试验方法。
1 酶标板概述
酶标板系列产品多选用光学透明纯聚苯乙稀制造，采用特殊工艺而成，酶标板类型主要根据酶标仪进行选择，从构造上可分为可拆卸和不可拆卸，有6孔、12孔、24孔、48孔、96孔之分，对于吸附试验可分为高结合力酶标板、中结合力酶标板和氨基化酶标板。在细胞试验中，酶标板需进行伽玛射线灭菌处理，可以使细胞达到最佳吸附状态，能促进原生代细胞：如神经细胞、传代细胞和肿瘤细胞等动物与人体细胞的生长和繁殖[3]。同时，随着酶标仪功能的研发和推广，酶标板也可应用于低紫外区的DNA、RNA定量及纯度分析和蛋白定量，酶活、酶动力学检测，酶联免疫测定，细胞毒性分析，细胞凋亡检测，报告基因检测及G蛋白偶联受体分析（GPCR）等试验的检测[4]。目前，酶标板已被食品工业、医药卫生、生物制药、农产品加工、卫生防疫等领域广泛应用。
但是，对于多个项目、多个版块同时进行，酶标板的操作是整个试验过程中工作量最为巨大的一部分，所以，研究者们对酶标板的使用进行了优化，设计了多种关于酶标板的辅助操作装置，以期为试验操作提供有效、便捷的方法和技术，保证试验数据的真实可靠。
2 酶标板外部的辅助操作装置
酶标板在使用时，常常需要对酶标板进行一个外部条件的控制，此时，只有利用合适的酶标板辅助操作装置才能有效地控制酶标板内部反应的有序进行。
2.1 加样辅助操作装置
ELISA试验的开展往往涉及大量的样品数量，但是传统的加样方式，不仅速度慢，而且加样的准确率也较低，故通过相关试验人员的研究，得到高效率的加样辅助操作装置是十分有利于试验的顺利开展。苏志春[5]等发明了一种新型酶标板加液感应器，其主要部件为板体、板条，所有板条均匀布满板孔并与指示板上指示灯相连，当加入的液体液位到达指示元件位置后，指示灯发出电平信号，方便试验人员进行液体滴加情况的实时监测。王可等[6]提供了一种新型酶标板辅助操作装置，依靠光学原理增强了酶标板的视觉效果，避免了试验操作中的漏滴错滴现象，确保了多孔同时加样的准确性。
2.2 孵育辅助操作装置
蓝翊文等[7]将孵育箱设置了顶盖，同时在放置层设置档口和弹簧，使各酶标板之间互相独立，互不干扰，有效地控制了操作过程中的偶然因素。王永峰[8]在孵育装置中使酶标板的空心孵育腔底部增加加热片，使其具有导热振荡功能，能够使酶标板在孵育过程中反应液得到充分的混合均匀;同时还安装了计时器和滑动盖板，以便使其在避光条件下准确的反应。
2.3 洗板辅助操作装置
洗板操作在酶标板使用过程中必不可少，是否有效去除残留物质会直接影响底物显色及读板等结果的显示。侯杰[9]在酶标板的清洗装置是通过安装有主机箱、清洗台等的一侧均匀的间隔安装清洗管和回液管，便于装置设置单行清洗、跳行清洗和板洗等的清洗方式，增加了装置清洗方式，便于装置的使用，并使酶标板可以重复多次使用。朱艳等[10]酶标板自动洗板装置通过三种不同的清洗液的交替使用，采用控制器控制和对四通阀门的控制实现冲洗方式的自动切换，以便调整冲洗速度，使洗板模式多样化，洗板的效果更明显。
3 酶标板内部的辅助操作装置
酶标板外部的辅助操作装置只能有限地控制试验的外部条件的变化，而在实际操作中，样品与底物的反应往往处于酶标板的内部，所以，应该设法使酶标板内部的样品和底物反应更加充分。袁振宏等[11]通过采用弹性膜的反应孔底面，并设置拉伸板，使酶标板的功能兼具平底和V型底的酶标板的优点，从而检测效果也大大提高。何韶衡[12]在传统酶标板的基础上，在酶标板孔内设置了一个空隙，使反应时的接触面积大大增加。将酶标板孔内部的形状重新设计，得到半球状的底部和漏斗型的中部以及凸出壁的上部，使得反应物之间的接触机会增加，交叉污染的机会减少。
4 结语
酶标板的辅助操作装置在设计上总结了试验过程中的问题和经验，设计理念逐渐趋向于专业化、产品化发展。但多数研究及专利在产品转化方面存在不足，某些工作只是停留于表面，没有真正落实到产品研发。相信随着生化技术领域的不断发展，酶标板相关配套装置的研发及市场应用前景也将更为明朗。
参考文献
[1] 焦奎，张书圣.酶联免疫分析技术及应用[M].北京：化学工业出版社，2004.
[2] 刘超英.酶联免疫吸附实验原理和酶标仪原理及维修[J].医疗卫生装备，2009，30（2）：110-111.
[3] 曾俊，张丹桂，王革非，等.酶标仪参数及性能检测[J].汕头大学医学院学报，2008，21（3）：176-177.
[4] 成军，孙关忠，郑怀竞，等.酶标仪性能评价与鉴定的基本方法及其初步应用[J].中华医学检验杂志，1998，21（1）：50-51.
[5] 苏志春，胡大龙，朱婷婷.一种酶标板加液感应器[P].中国专利：CN206420533U，2017-01-21.
[6] 王可，朱妮娜，武小暉，等.酶标板辅助操作装置[P].中国专利：CN207472893U，2018-06-08.
[7] 蓝翊文，赵梦露，林显玉，等.一种酶标板孵育架[P].中国专利：CN207992226U，2018-10-19.
[8] 王永峰.一种酶标板孵育检测器[P].中国专利：CN208156011U，2018-11-27.
[9] 侯杰.一种酶标板清洗装置[P].中国专利：CN207971145U，2018-10-16.
[10]朱艳，李永霞，代艳艳，等.一种酶标板自动洗板装置[P]. 中国专利：CN206997192U，2018-02-13.
[11]袁振宏，张宇，何敏超，等.一种多功能酶标板[P].中国专利：CN204666633U，2015-09-23.
[12]何韶衡.一种自由组装的酶标板[P].中国专利：CN106198960A，2016-12-07.
转载注明来源:https://www.xzbu.com/1/view-15189870.htm
