猪肉中4种氟喹诺酮类药物含量检测探究
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摘 要 氟喹诺酮药物作为广谱杀菌药物，价钱便宜，被广泛应用于牲畜治疗疾病上，存在残留于猪肉中的可能性。基于此，采用高效液相色谱法对河北省沧州市孟村回族自治县30处猪肉样品中4种氟喹诺酮类药物的含量进行检测。结果表明，当地猪肉中的环丙沙星、达氟沙星、恩诺沙星、沙拉沙星都没有超出国家标准。但是长期以往，人们长期食用此类猪肉，其后果让人担忧。
关键词 高效液相色谱;猪肉;氟喹诺酮
中图分类号：S859 文献标志码：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2020.02.075
氟喹诺酮是一类化学合成抗菌药物，1962年合成第一代喹诺酮类药物，只对大肠杆菌、痢疾杆菌、克雷白杆菌等少数菌有效，吸收效果差，副作用多，仅用于治疗尿路感染。1974年合成第二代喹诺酮类药物，对革兰氏阴性杆菌致病菌的作用明显，抗菌活性也大大提高，口服少量吸收，不良反应也明显减少，用于治疗尿路和肠道感染等疾病。1979年合成第三代喹诺酮类药，其母体都含有喹诺酮结构，母核6位C上被氟取代，氟喹诺酮因此而得名[1]。第三代药物结构发生了改变，增加了脂溶性，增强了对组织细胞的穿透力，因而吸收好，大大增加了该类药物的抗菌谱和杀菌效果。随着构效关系的研究进一步展开，新的氟喹诺酮类药物如雨后春笋，成为一个十分活跃的研究领域[2]。自1979年合成第三代喹诺酮（即诺氟沙星）以来，经过40年的发展，氟喹诺酮已成为在临床上应用广泛的广谱、高效、低毒抗菌药，常用于细菌性感染疾病，如呼吸道感染、消化道感染、泌尿系统感染等疾病的治疗[3]。
喹诺酮类抗生素也广泛用于治疗牲畜疾病。喹诺酮类药物具有抗菌谱广、抗菌活性强、与其他抗菌药物无交叉耐药性以及毒副作用小等特点，被广泛应用于水产、畜牧等养殖业中，包括在牛、鸡、鸭、猪等的养殖中用于疾病防治[4]。恩诺沙星是喹诺酮类抗生素的一种，对于预防和治疗畜禽的细菌性感染及支原体病有良好的效果，在猪病防治中，对包括大肠杆菌、克雷伯氏菌、肠杆菌属、弯曲杆菌属、绿脓杆菌、沙门氏菌属、气单胞菌属、嗜血杆菌属、耶尔森菌属、沙雷氏菌属、弧菌属、变形杆菌属等在内的革兰氏阴性杆菌和球菌，对布鲁氏菌属、巴斯德氏菌属、丹毒丝菌、博德特氏菌、葡萄球菌、支原体属和衣原体也有效[5-7]。近年来，氟喹诺酮类药物被养殖户广泛使用，作为饲料添加剂来预防动物疾病的发生，随之新的问题出现了，过度使用該类药物，致使动物体内该药物的残留量积累的越来越多。当前，世界各国对动物体内的氟喹诺酮残留的研究都很重视，如果我国不加以关注，会导致人们的健康存在巨大隐患，使得细菌的耐药性逐渐增加[8]。我国规定，动物性食品中环丙沙星、达氟沙星、恩诺沙星和沙拉沙星的检出限为20 μg·kg-1。为探究猪肉中4种氟喹诺酮类药物含量，本次采用高效液相色谱法对河北省沧州市孟村回族自治县30处猪肉样品中4种氟喹诺酮类药物的含量进行检测。
1 材料与方法
1.1 仪器设备与试剂
1.1.1 仪器设备
岛津系列高效液相色谱仪LC-20A;高速离心机（50 mL离心管）;固体萃取柱C18（100 mg·mL-1）;
0.45 μm微孔滤膜。
1.1.2 标准品和试剂
环丙沙星、达氟沙星、恩诺沙星、沙拉沙星等标准品购于农业部环境保护科研检测所测试中心;三乙胺、磷酸、磷酸二氢钾为优级纯;甲醇、乙腈均为色谱纯（Fisher公司）试剂;水为娃哈哈水。
1.2 色谱条件
色谱柱：phenomenexluna C18（4.6 mm×250 mm，
5 μm）。流动相：0.05 mol·L-1磷酸/三乙胺（pH=2.4）-乙腈（体积比82∶18）。流速：1.0 mL·min-1。检测波长：Ex=280 nm，Em=450 nm。进样量：20 μL;采用外标法峰面积定量。
1.3 标准溶液的配置
分别把环丙沙星、达氟沙星、恩诺沙星和沙拉沙星标准品1 000 μg·mL-1，用流动相稀释，达氟沙星稀释成20 μg·mL-1，其他三项稀释成100 μg·mL-1。分别取环丙沙星、达氟沙星、恩诺沙星和沙拉沙星单品稀释液
10 μL，流动相960 μL，制成含有环丙沙星、达氟沙星、恩诺沙星和沙拉沙星的混合标准工作液。
1.4 样品前处理
1.4.1 提取
称取2.00 g试料于离心管中，加磷酸盐提取液
10.0 mL，涡旋1 min（涡旋时间可以长一些），振荡
10 min，每分钟10 000 r离心10 min，上清液转入另一离心管中。用磷酸盐提取液10.0 mL洗残渣，涡旋1 min，振荡10 min，每分钟10 000 r离心10 min，合并上清液于同一离心管中，备用。
1.4.2 净化
备用液过固相萃取柱后，柱子依次用甲醇2.0 mL、磷酸盐缓冲液2.0 mL预洗，取上清液5.0 mL过柱，水
2.0 mL淋洗，挤干，进行吸附，后用1.0 mL流动相洗脱，挤干，收集洗脱液，过膜上机测定。
2 结果与分析
对孟村县30处猪肉样品中4种氟喹诺酮类药物的含量进行检测，结果见表1。
可以看出，孟村县6个乡镇的猪肉样品中都含有这4类氟喹诺酮药物，环丙沙星的平均值为8.654 μg·kg-1，达氟沙星的平均值为2.001 μg·kg-1，恩诺沙星的平均值为5.785 μg·kg-1，沙拉沙星的平均值为6.814 μg·kg-1。
3 结论与讨论
河北省沧州市孟村回族自治县30处采集点的猪肉，经检测均合格，其环丙沙星、达氟沙星、恩诺沙星、沙拉沙星含量数值都低于国标20 μg·kg-1。
但是，居民长期使用这种含有氟喹诺酮药物的食品，会不会对身体有害，会不会增加身体的耐药性，当身体出现疾病的时候，再使用此类药物会不会影响到实际药物的治疗效果等都有待研究，希望有关人士关注，加强对相关药物的研究，找到合适的解决方法。
参考文献：
[1] 刘荣立，韩宁娟，李亮.氟喹诺酮药物残留的检测方法研究进展[J].现代交际，2017（9）：188-189.
[2] 戴自英.实用抗菌药物学（第一版）[M].上海：科学技术出版社，1992.
[3] 黄迪海，张华，傅蓄，等.兽用氟喹诺酮药物长效制剂的研究与应用进展[J].山东农业科学，2012，44（2）：104-107，111.
[4] 张家禾，孟婷，周作红，等.动物性食品中氟喹诺酮类药物残留检测方法的研究进展[J]中国畜牧兽医，2014，41（5）：262-266.
[5] 李家泰.临床药理学（第一版）[M].北京：人民卫生出版社，1991.
[6] 范勇，杨国勤.南京地区1996年度喹诺酮类药物用药分析[J].中国药房，1997（6）：268-269.
[7] 陈华庭，张玉，陈伟，等.武汉地区1995年度喹诺酮类药物评估[J].中国药房，1997（3）：116-117.
[8] 王蕊，廖小萍，刘雅红.氟喹诺酮类兽药残留检测方法研究进展[J].广东农业科学，2010，37（10）：41-43.
（责任编辑：刘昀）
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