14种杀菌剂对玉米藤仓镰孢菌室内毒力测定

来源:用户上传      作者:马金慧　杨克泽　吴之涛　崔凌霄　任宝仓　杨成德　高正睿　陈志国

　　摘要：近年来，由藤仓镰孢菌（Fusarium fujikuroi）引起的玉米茎腐病在甘肃发生危害，造成部分品种植株枯死，严重减产。为筛选防治玉米藤仓镰孢茎腐病的高效低毒杀菌剂，本研究采用菌丝生长速率法测定14种杀菌剂对藤仓镰孢菌的毒力。结果表明：10%苯醚甲环唑WG、12.5%戊唑醇EW、75%肟菌·戊唑醇WG和70%丙森锌WP对藤仓镰孢菌菌丝的生长均有较好的抑制作用。对该菌毒力最强的杀菌剂是12.5%戊唑醇EW，其EC50值为0.0831 μg/mL;较强的是10%苯醚甲环唑WG和75%肟菌·戊唑醇WG，其EC50值分别为0.2927 μg/mL和0.3914 μg/mL;70%丙森锌WP和75%百菌清WP的毒力相对较强，EC50值分别为0.6404 μg/mL和0.7487 μg/mL;2%春雷霉素AS毒力最弱，EC50 值为45.6161 μg/mL。玉米藤仓镰孢菌菌丝生长对75%肟菌·戊唑醇WG、0.3%四霉素AS、80%代森锰锌WP和2%春雷霉素AS的敏感性相对较强，对75%百菌清WP、77%氢氧化铜WP和50%烯酰吗啉WG的敏感性较弱。
　　關键词：玉米茎腐病;藤仓镰孢菌（F.fujikuroi）;生长速率法;毒力测定
　　中图分类号：S482文献标识号：A文章编号：1001-4942（2020）03-0102-05
　　AbstractIn recent years， corn stalk rot caused by Fusarium fujikuroi occurred seriously in Gansu Province， causing some varieties to die and yield-reduction seriously. In order to screen out the high-efficiency and low-toxicity fungicides for field control of corn stalk rot， the toxicity of 14 fungicides to F. fujikuroi was determined by mycelium growth rate method. The results showed that 10% methyloxazole WG， 12.5% tebuconazole EW， 75% oxime bacteria·tebuconazole WG and 70% propineb WP had better inhibitory effects on mycelium growth of F. fujiana，in which，12.5% tebuconazole EW had the strongest toxicity to F.fujikuroi with the EC50 value as 0.0831μg/mL. The toxicity of 10% methyloxazole WG and 75% oxime bacteria·tebuconazole WG was stronger，and the corresponding EC50 values were 0.2927， 0.3914 μg/mL， respectively. 70% propineb WP and 75% chlorothalonil WP had relatively stronger toxicity with the EC50 values as 0.6404 and 0.7487 μg/mL， respectively，While that of 2% kasugamycin AS was the weakest with the EC50 value as 45.6161 μg/mL. The mycelial growth of F.fujikuroi was relatively sensitive to 75% oxime bacteria·tebuconazole WG， 0.3% tetramycin AS， 80% carmazine WP and 2% kasugamycin AS， but less sensitive to 75% chlorothalonil WP， 77% copper hydroxide WP and 50% dimethomorph WG.
　　KeywordsCorn stalk rot;Fusarium fujikuroi;Growth rate method;Toxicity test
　　玉米是重要的粮饲兼用型作物和工业原料、能源植物[1]，种植范围广，在农业生产和国民经济中占有重要地位。近年来，由于来自全国各地的杂交组合增多，加之连年种植，重茬迎茬严重，甘肃制种玉米病害发生呈现复杂性。2016年甘肃首次发现由藤仓镰孢菌（Fusarium.fujikuroi）引起的玉米茎腐病[2]，发病植株通常表现为地上第二节以上部位发病。受害植株主要表现为茎基部叶鞘上呈圆形、近圆形水渍状病斑，剥开叶鞘后可见发病部位有白色稀疏霉层，茎节部腐烂并缢缩，病重时绕茎秆一周，发病节上部青枯，造成植株矮化、倒伏、枯死和田间断垄。该病在大喇叭口期田间呈顺行连片发生，一旦发病会造成严重损失，甚至绝收，严重影响玉米产量，其它生育期未见发生。目前此病已在武威、张掖等地制种田发生，2018年武威大田中也已发现，并造成一定面积的损失。
　　国内外研究表明，藤仓镰孢菌是引起水稻恶苗病的重要致病菌[3，4]，对其研究也是作为水稻恶苗病的主要病原菌而进行[5，6]，有关该菌对其它作物危害的研究较少。本试验在前人对藤仓镰孢菌引起的玉米茎腐病症状、病原菌及其生物学特性研究的基础上，选择14种杀菌剂，研究其对玉米藤仓镰孢菌的毒力，以期筛选出有效药剂，为该病防治提供技术依据。 　　1材料与方法
　　1.1病原菌
　　本试验于2017年在甘肃省农业工程技术研究院植物病理学实验室进行。藤仓镰孢菌在甘肃省农业工程技术研究院植物病理实验室4℃冰箱中保存。
　　1.2供试培养基
　　采用PDA培养基对病原菌进行保存和活化。
　　1.3供试杀菌剂
　　供试杀菌剂共14种（表1）。1.4试验方法
　　菌丝生长速率抑制法：根据预试结果，将不同杀菌剂用无菌水配制成5个浓度（质量浓度）梯度（表2）。分别将不同浓度药剂按照体积比1∶9的比例加入到灭菌冷却至50℃的PDA培养基中，充分混匀后分别倒入直径9 cm的灭菌培养皿中，制成系列浓度的含药培养基。每处理设3次重复，以加入无菌水的PDA培养基作对照。用直径0.5 cm的无菌打孔器沿着菌种同一个圆周打孔，用灭菌镊子将打好的菌饼接种到含药培养基的正中央，菌丝面朝下，每皿一块，于25℃恒温培养箱中培养6 d。采用十字交叉法测量菌落直径（cm），取平均值，计算抑菌率。
　　抑菌率（%）=（对照菌落直径-处理菌落直径）/（对照菌落直径-0.5）×100。
　　1.5数据处理与分析
　　采用Microsoft Excel和SPSS软件对数据进行处理分析。将抑菌率换算成抑制几率值，药剂质量浓度转化为对数值，并用回归法求毒力回归方程和相关系数，计算EC50值。
　　2結果与分析
　　2.1不同杀菌剂对藤仓镰孢菌菌丝的抑制作用
　　由表2可以看出，处理后6 d，各杀菌剂不同浓度处理对藤仓镰孢菌菌丝均有不同程度的抑制作用，同种杀菌剂随浓度增大菌落直径逐渐减小、抑制率逐渐增大。其中，10%苯醚甲环唑WG、12.5%戊唑醇EW（最低浓度处理除外）、75%肟菌·戊唑醇WG和70%丙森锌WP不同浓度处理的抑菌率均达到60%以上。各杀菌剂中，75%肟菌·戊唑醇WG浓度7 μg/mL时其抑制率达到100%;10%苯醚甲环唑WG浓度152 μg/mL时其抑制率达到98.4%;0.3%四霉素AS和80%代森锰锌WP浓度分别为111、86 μg/mL时其抑菌率分别为98.3%和99.6%，但其它浓度的抑菌率均较低;2%春雷霉素AS浓度0.78 μg/mL时其抑菌率为1.6%，几乎对藤仓镰孢菌菌丝没有抑制作用。由此认为，10%苯醚甲环唑WG、12.5%戊唑醇EW、75%肟菌·戊唑醇WG和70%丙森锌WP对藤仓镰孢菌菌丝的生长均有较好的抑制作用。
　　2.2不同杀菌剂对藤仓镰孢菌的室内毒力测定
　　由表3可知，14种杀菌剂对玉米藤仓镰孢菌的毒力由强到弱依次为12.5%戊唑醇EW、10%苯醚甲环唑WG、75%肟菌·戊唑醇WG、70%丙森锌WP、75%百菌清WP、50%多菌灵WP、80%代森锰锌WP、47%春雷·王铜WP、62.5 g/L精甲·咯菌腈SC、70%甲基硫菌灵WP、0.3%四霉素AS、77%氢氧化铜WP、50%烯酰吗啉WG和2%春雷霉素AS。其中12.5%戊唑醇EW的毒力最强，其EC50值为0.0831 μg/mL;10%苯醚甲环唑WG和75%肟菌·戊唑醇WG的毒力相对较强，其EC50值分别为0.2927 μg/mL 和0.3914 μg/mL;而2%春雷霉素AS的毒力最弱，其EC50 值为45.6161 μg/mL。
　　按照回归方程的斜率k与杀菌剂对病原菌的敏感性成正比的关系，供试药剂中，斜率k最大为3.2237，说明藤仓镰孢菌对75%肟菌·戊唑醇WG最为敏感;其次斜率k相对较大时为1.8201，说明其对0.3%四霉素AS较为敏感;80%代森锰锌WP和2%春雷霉素AS的斜率k分别为1.2606和1.2021，说明其对这两种药剂相对敏感;斜率k在0.5467～0.6718之间，说明其对75%百菌清WP、77%氢氧化铜WP和50%烯酰吗啉WG的敏感性较弱。
　　
　　3讨论与结论
　　玉米茎腐病的病原菌主要有腐霉菌和镰孢菌，其中由禾谷镰孢菌所致该病的报道较多 [7-9]，由藤仓镰孢菌引起的茎腐病鲜有报道。本研究以藤仓镰孢菌为供试菌株，测定14种杀菌剂对该菌的室内毒力。结果表明：14种供试药剂中对玉米藤仓镰孢菌的毒力较强的有12.5%戊唑醇EW、10%苯醚甲环唑WG和75%肟菌·戊唑醇WG、70%丙森锌WP和75%百菌清WP，2%春雷霉素AS毒力最弱。玉米藤仓镰孢菌菌丝生长对75%肟菌·戊唑醇WG、0.3%四霉素AS、80%代森锰锌WP和2%春雷霉素AS敏感性相对较强，对75%百菌清WP、77%氢氧化铜WP和50%烯酰吗啉WG的敏感性较弱。藤仓镰孢菌作为水稻恶苗病的主要病原菌研究较多，如陈宏州等[10]室内毒力测定表明戊唑醇对藤仓镰孢菌的毒力最强，这与本研究结果一致，但在田间试验中戊唑醇的防治效果并不很突出。多菌灵对藤仓镰孢菌也有一定抑制作用，但相关研究显示该菌对多菌灵产生了抗药性 [11]，生产中不建议推荐使用。整体来看，三唑类杀菌剂对于藤仓镰孢菌的抑制效果较为明显。室内毒力测定虽然可为玉米藤仓镰孢茎腐病的防治提供一定的理论依据，但室内筛选的药剂在大田中的防效可能存在差异，因此还需在探明该病发病规律和流行因素的前提下通过大田试验对室内所选药剂的效果进一步验证。
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