液相色谱

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　　摘要：本研究提出了采用液相色谱——串联质谱法检测梨果实中螺虫乙酯残留的方法。梨果试样利用乙腈为提取剂，N-丙基乙二胺（PsA）、石墨化炭黑（GCB）和C18为分散净化剂的QuEChERS方法，液相色谱一串联质谱分离测定，外标法定量。结果：螺虫乙酯在空白梨果样品中的平均回收率在75.27%～81.32%，相对标准偏差为3.4%～4.1%，方法检出限为0.0003mg/kg，定量限为0.001mg/kg。表明该检测方法的精密度和准确度符合农残标准的要求，适用于梨果实中检测螺虫乙酯的残留。
　　关键词：螺虫乙酯;梨果;液相色谱——串联质谱法;QuEChERS
　　螺虫乙酯是季酮酸类化合物，化学名称为4-（乙氧基羰基氧基）-8-甲氧基3-（2，5一二甲苯基）-1-氮杂螺一癸-3-烯2-酮山。该类农药是通过灭杀幼虫和降低成虫的繁殖能力，以达到防治害虫的目的。螺虫乙酯是目前我国防治农业害虫的理想生物农药，近年来，在梨树生产中得到了广泛应用，但关于螺虫乙酯在梨果中的残留分析方法很少有报道。
　　1材料与方法
　　1.1供试农药
　　22.4%螺虫乙酯。
　　1.2供试试剂与仪器
　　（1）试剂：乙腈（分析纯）;氯化钠（分析纯），140°C烘干4h;无水硫酸镁（分析纯），140°C条件下烘干4h;PSA;GCB;Cm;甲酸（色谱纯）。（2）仪器：液相色谱串联质谱仪;高速均质机;涡旋混匀器;离心机。
　　1.3供试试材
　　梨果。
　　1.4试验方法
　　1.4.1标准溶液的配置。质量浓度为100m～L的螺虫乙酯标准溶液，将其逐级稀释成5个浓度梯度（0.1ug/L、0.5ug/L、1.0ug/L、6.0ug/L、8.0ug/L）。
　　1.4.2样品的提取和净化。准确称取10g待测梨果样品充分匀浆后放于50mL离心管中，依次加入20mL乙腈、2g无水硫酸镁、1g氯化钠混匀，用均质器在15000r/min下均质提取2min，在4000r/min离心10min，取2mL上清液于15mL离心管，加入0.05gSA、0.01gGCB、0.15g无水硫酸镁，用涡旋混匀器混合3min，4000r/min离心10min，取1mL上清液，过0.22um滤膜，待测。
　　1.4.3液相色谱一串联质谱法测定条件。（1）液相色谱测定条件：色谱柱（1.8um，2.1mm×50mm）;流动相为A-0.01%甲酸水溶液，B-乙腈;流速为0.45mL/min，进样量为5uL;梯度洗脱程序有3步，分别用乙腈10%-50%（0～3min）、乙腈50%（3～8min）、乙腈50%～10%（8～10min）进行梯度洗脱。（2）质谱条件：质谱正离子扫描方式为多反应监测模式，离子源喷雾器电压为4800V;定性离子：374.2;定量离子：302.1、330.1;Fragmentor：100V，碰撞能量为15V。
　　2结果与讨论
　　2.1线性范围和定量限
　　分别测定质量浓度为0.1、0.5、1.0、6.0、8.0ug/L的螺虫乙酯标液，得到的标准曲线线性方程为y=1173.8x-62.381，绝对系数r2为0.9994。方法检出限为0.0003 mWkg，方法定量限为0.001mg/kg。
　　2.2方法的灵敏度
　　在上述检测条件下，液相色谱——串联质谱法检测梨果中螺虫乙酯的最低检出浓度为0.001mg/kg，远低于我国仁果类果实MRL值（0.7mWkg），液相色谱——串联质谱法的灵敏度，能够满足梨果中螺虫乙酯检测的要求。
　　2.3添加回收率
　　在空白梨果中分别添加质量浓度为0.001、0.01、0.7mg/kg的螺虫乙酯标品，进行添加回收率试验。试验表明，螺虫乙酯在空白梨果中的的添加平均回收率分别为81.32%、78.01%和75.27%，其变异系数分别为3.4%、4.1%和3.9%，在允许的公差范围内，表明了上述方法的准确度和精密度均符合农药残留检测分析要求。
　　2.4结论
　　本试验采用乙腈提取梨果中的螺虫乙酯，采用QuECh-ERS方法进行样品前处理，利用液相色谱——串联质谱法（LC-MS/MS）进行检测，最低检出浓度为0.001mg/kg，在空白梨果中进行添加回收率试验，其平均回收率为75.27%-81.32%，相对标准偏差为3.4%-4.1%，能够满足国内外法规对梨果中螺虫乙酯残留的限量要求，可用于梨果中該类农药残留的检测和确证。
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