复合辅料炮制何首乌对二苯乙烯苷和游离蒽醌的影响

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　　【摘 要】 目的：研究不同复合辅料对何首乌有效成分二苯乙烯苷和游离蒽醌含量的影响，为选择何首乌炮制辅料提供依据。方法：分别采用4种复合辅料炮制何首乌，用高效液相色谱法测定二苯乙烯苷和游离蒽醌的含量。结果：各炮制品中二苯乙烯苷含量均高于《中国药典》2015年版中的要求，游离蒽醌含量均未达到《中国药典》2015年版中的要求;其中，采用黑豆汁生姜汁炮制的二苯乙烯苷和游离蒽醌的含量最高，分别是6.19%和0.04%;另外，二苯乙烯苷和游离蒽醌含量最低的分别是用黑豆汁米泔水制和用黑豆汁熟地汁制的。结论：不同复合辅料对何首乌成分二苯乙烯苷和游离蒽醌的影响不同。
　　【关键词】 何首乌;炮制辅料;二苯乙烯苷;蒽醌
　　【中图分类号】R283.2   【文献标志码】 A    【文章编号】1007-8517（2020）13-0044-05
　　Abstract：Objective To study the effect of different composite excipients on the content of stilbene glycoside and free anthraquinone in Polygonum multiflorum Radix， and to provide basis for selecting processing excipients of Polygonum multiflorum Radix. Methods Polygonum multiflorum Radix was processed with 4 kinds of compound auxiliary materials respectively， and the content of stilbene glycoside and free anthraquinone were determined by HPLC.Results The content of stilbene glycoside in each processed product is higher than the requirements in the 2015 edition of Chinese Pharmacopoeia， and the content of free anthraquinone does not meet the requirements in the 2015 edition of Chinese Pharmacopoeia. Among them， stilbene glycoside and free anthraquinone processed with black bean juice and ginger juice have the highest content， which are 6.19% and 0.04% respectively. In addition， stilbene glycoside and free anthraquinone with the lowest content are respectively prepared from black bean juice rice swill and black bean juice rehmannia glutinosa juice. Conclusion Different composite excipients have different effects on stilbene glycoside and free anthraquinone in Polygonum multiflorum Radix.
　　Keywords：Polygonum multiflorum Radix; Processing Accessories; Stilbene Glycoside; Anthraquinone
　　 何首烏为蓼科植物何首乌 （Polygonum multiflorum Thunb.）的干燥块根，生品具有解毒、消痈、润肠通便的功效，炮制品具有补肝肾、益精血、乌须发、强筋骨的功效[1]。历代医籍和本草中记载何首乌的炮制辅料有黑豆、酒、醋、米泔水、熟地汁、黑豆生姜汁、甘草汁等 [2-3]。查阅历代药典和全国15个省市炮制规范，其中记载的何首乌炮制辅料为黑豆和黄酒[3]，2015年版《中国药典》中何首乌炮制辅料只有黑豆，为何药典淘汰了其他辅料只留单一的黑豆？不同辅料对何首乌药效成分有何影响目前尚未明确。本实验分别选用生姜汁、甘草汁、熟地汁、米泔水和黑豆汁等组成复合辅料，按照2015年版《中国药典》中制何首乌的炮制方法制备何首乌，比较复合辅料所炮制的何首乌中二苯乙烯苷和游离蒽醌的含量，阐明复合辅料对何首乌中药效成分的影响，为选择何首乌炮制辅料提供参考。
　　1 材料与方法
　　1.1 材料
　　1.1.1 药材 何首乌原药材（五年生）购于广东省肇庆市德庆县，经清远市中医院朱卫星主任中药师鉴定为蓼科植物何首乌（Polygonum multiflorum Thunb.）的块根。
　　1.1.2 试剂 二苯乙烯苷对照品（中国食品药品检定研究院，批号：110844-201713），大黄素对照品（中国食品药品检定研究院，批号110756-201512），大黄素甲醚对照品（中国食品药品检定研究院，批号：110758-201817），乙腈、甲醇为色谱纯（德国默克公司），乙醇为分析纯（广州化学试剂厂，批号：2019030118），甲醇为分析纯（广州化学试剂厂，批号：2019010124），超纯水。
　　1.1.3 仪器 2695-2489高效液相色谱仪（Waters公司）;依利特-Supersil色谱柱：ODS 25μm，4.6 mm×150 mm，柱号：E2913576;十万分之一分析天平XS205（METTLER TOLRDO梅特勒-托利多公司）;DHG-9023A电热恒温谷风干燥箱（上海精宏实验设备有限公司）;XMTD-7000电热恒温水浴锅（北京永光明医疗仪器有限公司）。 　　1.2 炮制方法
　　1.2.1 生何首乌片制备 取生鲜何首乌，除去杂质，洗净，大小分档，切厚片（1～2 cm），备用。
　　1.2.2 黑豆汁制法[1] 取黑豆250 g，加水适量，煮约4 h，熬汁约500 mL，豆渣再煮3 h，熬汁约125 mL，合并得黑豆汁约625 mL。（生鲜何首乌片500 g用黑豆汁125 mL）。
　　1.2.3 各何首乌炮制品的炮制方法 将生鲜何首乌片（各500 g）置带盖的炖盅中分别加入表1项下各复合辅料，拌匀，密闭，隔水共炖6 h，取出，60 ℃烘干，即得。
　　
　　1.3 制何首乌水分测定 按照《中国药典》2015版四部通则0832第二法，测定不同复合辅料制备的何首乌样品的水分含量。
　　1.4 制何首乌二苯乙烯苷和游离蒽醌含量测定 按照《中国药典》2015年版中制何首乌成分含量测定项下方法分别测定不同复合辅料制备的何首乌样品中二苯乙烯苷、游离蒽醌（以大黄素和大黄素甲醚计）的含量。
　　2 结果
　　2.1 不同复合辅料制备的何首乌样品的水分含量 不同复合辅料制备的何首乌样品的水分含量在10.48%～11.50%之间，水分含量均未超过12%，符合《中国药典》2015年版的要求。结果见表2。
　　2.2 不同复合辅料制备的何首乌样品中二苯乙烯苷含量的比较 不同复合辅料制备的何首乌样品中，黑豆汁生姜汁制何首乌的二苯乙烯苷含量最高，黑豆汁米泔水制何首乌的二苯乙烯苷含量最低。不同复合辅料制备的何首乌样品中二苯乙烯苷含量从高到低依次为黑豆汁生姜汁何首乌>黑豆汁制何首乌（对照）>黑豆汁熟地汁制何首乌>黑豆汁甘草汁制何首乌>黑豆汁米泔水制何首乌，结果见表3;各何首乌炮制品的二苯乙烯苷色谱图如图1所示。
　　2.3 不同复合辅料制备的制何首乌中游离蒽醌含量的比较 不同复合辅料制备的制何首乌中，黑豆汁生姜汁制何首乌的游离蒽醌含量最高，黑豆汁制何首乌（对照）的游离蒽醌含量最低。复合辅料制备的制何首乌中游离蒽醌含量从高到低依次为黑豆汁生姜汁何首乌>黑豆汁米泔水制何首乌≈黑豆汁甘草汁制何首乌>黑豆汁熟地汁制何首乌>黑豆汁制何首乌（对照），结果见表4;各何首乌炮制品的游离蒽醌色谱图如图2所示。
　　3 讨论
　　何首烏是一种常用的中药材，目前，最新研究已从其中分离出二苯乙烯苷类、蒽醌类、黄酮类、磷脂类、苯丙素类等133种成分 [4-5];现代药理研究认为[6-8]，二苯乙烯苷是何首乌保肝护肝的重要有效成分，结合蒽醌则具有泻下作用;生何首乌经炮制后，二苯乙烯苷含量升高，保肝护肝作用增强，结合蒽醌含量则降低，转变为游离蒽醌，导致泻下作用减弱，故何首乌经炮制后可改变药性、降低滑肠致泻的副作用。2015年版《中国药典》规定，制何首乌（黑豆汁制）按干燥品计算二苯乙烯苷含量不得低于0.7%;游离蒽醌以大黄素和大黄素甲醚的总量计，不得少于0.10%[1]。由本研究结果显示，各何首乌炮制品中二苯乙烯苷含量均高于2015年版《中国药典》制何首乌的含量要求，游离蒽醌含量则未达到2015年版《中国药典》的要求。有研究表明，用鲜品直接加工炮制所得的样品中二苯乙烯苷的含量要高于传统加工炮制的，而游离蒽醌的含量则是鲜品直接炮制的明显低于传统加工炮制的[9-10]。
　　 本研究中，用黑豆汁生姜汁所制得的何首乌中二苯乙烯苷和游离蒽醌的含量是最高的，分别是6.19%和0.04%，而用黑豆汁米泔水、黑豆汁甘草汁和黑豆汁熟地汁等复合辅料所制得的何首乌炮制品中二苯乙烯苷的含量均比单一的黑豆汁（对照）所制得的何首乌炮制品中二苯乙烯苷含量要低，游离蒽醌的含量则相反;说明用单一辅料炮制和用复合辅料炮制对何首乌有效成分的影响也不同，且不同辅料具有不同的药理作用[11-13];黑豆具有活血、利水、解毒、滋补等作用，用黑豆汁炮制后的何首乌能增强补肝肾、益精血、乌须发、强筋骨的作用，同时能消除滑肠致泻的副作用;生姜能发表散寒、止呕开痰和解毒;米泔水有清热、止烦渴、利小便、凉血、解毒等功效;甘草有补脾益气、清热解毒、祛痰止咳、缓急止痛、调和诸药的作用;熟地具有滋阴补血、益精填髓的功效;用黑豆汁与米泔水、生姜汁、甘草汁、熟地汁组合成复合辅料炮制何首乌，对药效成分的影响不同。刘亚蕾等[14]通过研究发现，米泔水能吸附何首乌中难溶于水的物质，用米泔水炮制何首乌的减毒效果最好，可以促进毒性成分降低或转化以达到炮制减毒且保存药效或增效目的;生姜汁制则可缓和药物毒副作用、降逆止呕[15]，同时具有引药归经、协同增效等作用;用甘草汁炮制中药可减毒或改变药性[16];熟地汁炮制药材则有增强补益的作用[11-13]。
　　 本研究结果显示，所有辅料对何首乌二苯乙烯苷和游离蒽醌含量都有一定的影响，在实际应用中，可根据临床需要，选择合适的炮制辅料，以达到减毒增效的目的，同时，需要不断传承和挖掘传统中药炮制技术的宝贵经验，采用现代科学技术揭示何首乌炮制的科学原理和机制，增加炮制辅料的质量标准，从而建立何首乌炮制质量评控方法和标准。
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　　（收稿日期：2020-04-08 编辑：陶希睿）
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